一、膜蛋白簡介
膜蛋白在細胞中飾演著重要的角色：比如被熟知的辨識、信號轉導、運輸等功能，也是服藥的理想的靶向，雖植物細胞主要有9種膜脂，而膜蛋白的種類繁雜，多數膜蛋白分子數量較少，但卻賦于細胞膜十分重要的生物學功能。
按照膜蛋白分離的難易及其與脂分子的結合形式，膜蛋白可分為兩大類型：外在膜蛋白、內在膜蛋白。
(1)外在膜蛋白為水溶性蛋白，靠離子鍵或其它較弱的鍵與膜表面的蛋白質分子或脂分子結合，因而只要改變堿液的離子硬度甚至提升體溫就可以從膜上分離出來，膜結構并不被破壞。
(2)內在膜蛋白與膜結合十分緊密，通常只有用去垢劑()使其膜解后才可分離下來。
附注：使用分級抽提方式獲得的“膜蛋白”中只有極少一部份是具備多跨膜區的整合膜蛋白。
二、膜蛋白的提取方式
談及蛋白分離，我們想到：超速離心，鹽析法、超濾法、凝膠過濾法、等電點沉淀法、離子交換層析、親和層析、吸附層析、逆流分溶、酶解法……有時這種方式往往組合到一起對特定的物質進行分離純化。因為蛋白質種類繁雜，不同的蛋白質因為結構和組成的差別，其溶化度也各不相同.按照蛋白質的溶化特點，同時可選擇不同的溶劑提取，分為水堿液提取和有機溶劑提取.
然而與胞質蛋白，核蛋白提取不同之處在于膜蛋白是嵌在膜中的，水溶性不好，基本方式就是用不同的離心速率除去胞質蛋白等，之后用去污劑把蛋白從膜中釋放下來。膜蛋白分離純化的重要步驟是選擇適當的增溶用表面活性劑，通常常用的有膽絡合物，CHAPS(一種離子去污劑），和等表面活性劑。
1）先分離膜，之后提取；如選用冷熱交替法、反復凍融法、超聲破碎法、玻璃勻漿法、自溶法和酶處理法促使細胞破碎，之后通過梯度離心得到富含膜蛋白的粗組分。（比如：用液氮碾磨組織，加入勻漿緩沖液及蛋白酶抑制劑，之后差速離心、蔗糖密度梯度離心。搜集37%與41%間的成份，即為質膜部份。裂解即可搜集膜蛋白）
2）用特殊的去污劑選擇性的分離。從膜上提取蛋白有許多困難。在多數情況下，都是采用去垢劑將疏水蛋白從其膜結構中溶化出來，之后將蛋白質穩定。去垢劑的選擇一般是根據他對所須要蛋白質的提取效率來確定細胞膜色譜，但在個別情況下，還要考慮到之后的純化步驟。其實許多膜蛋白必須在去垢劑存在的情況下進行純化，但最終仍可能須要去除去垢劑。這往往會導致蛋白質失活，但若果蛋白質是用于測序的，他將不是一個問題。倘若不是用于測序的細胞膜色譜，可考慮使用才能粘附去垢劑的疏水珠.許多文獻和生化試劑供應商的產品目錄中，都介紹有許多種不同的可拿來溶化膜蛋白的去垢劑.但是，她們并不是普遍適用的.在設計膜蛋白溶化方案時，必須考慮某一去垢劑的特殊性質.如X-100在280nm處有吸收，假若某蛋白質的測試與280nm處的吸收有關，就應防止使用這類去垢劑.
將膜劑型與胞質蛋白及細胞核分離后，再進一步從細胞膜劑型上將所需的膜蛋白增溶出來.這些做法的用處是可以用強烈的去垢劑提取細胞骨架的相關蛋白，而無需考慮胞質蛋白、細胞核成份或染色質成份的混進.使用這些方式所獲得的膜蛋白，無論在種類上還是數目上，都比酸溶化法所得到的蛋白（
3)膜蛋白色譜(of,CMP)：CMP分離強疏水性蛋白、多肽混和物的層析系統，通常有去垢劑（如SDS）溶化膜蛋白后產生SDS-融膜蛋白，并由甲基磷灰石為固定相的木柱分離純化。甲基磷灰石柱具有陰離子乙酸官能團（P-端），又具有陽離子鈣（C-端），與固定相結合主要決定于膜蛋白的大小、SDS結合量。借助原子散射法研究cAMP的分離機制發覺，樣品與SDS結合后在離子交換柱上存在SDS分子、帶電荷多肽與固定相中帶電離子間的交換，進而達到分級分離的目的。
4)次序抽提法：按照細胞蛋白溶化性的差別，器具有不同溶化能力的蛋白溶化液進行抽提的方式。用Tris堿堿液裂解細胞提取高溶化性蛋白；把未溶化的沉淀用標準液溶化提取高疏水性蛋白；最后用含復合表面活性劑的蛋白溶化液，可以再度抽提前兩次抽提后不能溶化的膜蛋白。
5)離心蛋白提取法（）
原理：高滲的蛋白裂解液讓細胞縮聚斷裂后，超高速離心
評價：雖然分級(胞漿和胞膜)之間有清洗的步驟,并且可溶性蛋白組分和膜蛋白組分之間依然有不少重復的點.該方式相較MP院士在1998年上發表的分級抽提法除以了第一步(用tris抽提水溶性蛋白)和最后一步(極難溶蛋白),在操作上也作了簡化,總而言之是一種不錯的方式。
6)-based：提取時先用裂解液裂解胞膜（選用不同的去污試劑是關鍵），梯度離心分離細胞器(ER)，之后分級抽提方式。諸如，除去細胞器以后的就是核膜，再裂解得到核膜蛋白。而膜蛋白是裂胞膜時不溶的部份。
總的體會：細胞的量要很充足。以后的定性鑒別常用的技巧有單向免疫擴散、免疫電泳及聚丙稀丙酯凝膠電泳等。純化蛋白質含量的定量測定可用雙縮脲法、酚試劑法或紫外光吸收法定量鑒別膜蛋白，便捷迅速。