湖北第二師范大學生物系,湖南長沙;惠陽農業工程大學農業與園林大學,江蘇南京)摘要:對簡易曝曬和常規抽氣兩種測定動物莖稈相對濁度率的方式進行比較研究,結果顯示:借助曝曬法(處理12與抽氣法(處理所測得的莖稈相對濁度率值呈極明顯正相關,說明兩種測定方式考察動物莖稈膜透性的整體變化趨勢具有一致性.經殘差剖析結果顯示,兩種測定方式測定值間的差別均不明顯(因而,考慮到用曝曬法比抽氣法操作便捷、更加節約材料處理時間,建議曝曬方式在實驗室剖析技術中推廣使用.關鍵詞:相對濁度率;動物莖稈;曝曬法;抽氣法中圖分類號:94文獻標示碼:文章編號:(2010)收稿日期:作者簡介:福建建陽人,廣州第二師范大學生物系院長.相對濁度率是反映動物膜系統狀況的一個重要的生理生化指標,動物在遭到逆境或則其他損傷的情況下細胞膜容易斷裂,膜蛋白受傷害以致使胞質的胞液外滲而使相對濁度率減小,其反映直接實際,是一個比較有用的數據.測定濁度率的方式有多種,按照現代動物生理學實驗手冊上面提及的傳統方式,濁度率是用抽氣法測定,其測定結果穩定、精確,但實驗過程較為復雜,費時,而按照新版動物生理學實驗指導是通過曝曬法來測定濁度率.此法操作便捷、省時,但其確切程度有待研究.因而,本實驗通過與濁度率值傳統抽氣測定方式的比較研究,進一步對曝曬法在精確度、時效性及成本等方面深入剖析,驗證其在現實操作中的應用可行性細胞膜透性,具有一定實踐意義.儀器與設備濁度儀、抽真空注射器、燒杯、膠頭滴管、刻度試管、剪刀、鑷子、試管架、濾紙、玻璃棒、記號筆、標簽、鐵架臺、電子天平、電爐.實驗材料兩種方式的實驗材料均采用來源相同的14養殖物莖稈,分別命名為:L1(Vol.年.,S2,S3,S4,S5,S6,P1,P2,P3,P4及P5(鑒于材料來源需保密細胞膜透性,因而在本文中均以字母代碼給出)各樣本材料中,L1,L2,L3是生長正常的三種動物莖稈,S1~S6P1~P5樣本均由實驗員專門提供(其中,S1~S6樣本是經不同含量果酸處理過的蘿卜苗莖稈,P1~P5樣本是經過不同含量PP333矮化處理過的蘿卜苗莖稈(果酸處理和PP333處理瓜苗主要是為了研究不同處理對降低瓜苗抗性的療效。
樣本含量編碼樣本P5含量(mg/分別代表樣本S1~S6分別代表樣本P1P5曝曬法取大小相當的動物莖稈(盡量保證莖稈的完整性,用自來水瀝干后再用分餾水沖洗3用濾紙吸走表面水份,將莖稈剪成適合寬度的長條(避免主脈)別放在10ml去離子水的刻度試管中,蓋上玻璃塞放在溫度下曝曬處理12之后開水浴加熱30min,冷卻至溫度后磨碎,再度測定浸提液濁度(R2)相對濁度率=R1/R2抽氣法取大小相當的動物莖稈(盡量保證莖稈的完整性,用自來水沖洗后再用分餾水沖洗干凈,用濾紙吸凈表面水份.避免主脈將莖稈切割成大小一致的葉塊,混和均勻,稱量0.ml去離子水的注射器中,不斷抽氣漏氣,直到莖稈完全墜入水中,將抽真空后的莖稈在離子水底處理用濁度儀測定浸提液濁度(R1)之后開水浴加熱30min,冷卻至溫度后磨碎,再度測定浸提液濁度(R2)復三次.相對濁度率=R1/R2不同測定方式濁度率測定值比較14養殖物莖稈的相對濁度率值測定結果如圖所示。從圖1可以看出兩種測定方式的測定值存在一定差別.總體上抽氣法測定值低于曝曬法測定值.兩種濁度率測定方式測定值反映出的不同處理間相對濁度率變化趨勢基本一致(抽氣法與曝曬法測定值之間差別剖析剖析兩種測定方式測定值差別(可知,用抽氣法和曝曬法測得的相對濁度率值有一定差別,最大相對濁度率差別比率達到了37.93%,最小差別比率為2.15%,測定值總體上是用抽氣法所得的濁度率值低于用曝曬法所得值,差別平均值為17.11%,總體差別不大.抽氣法與曝曬法測定值之間差別樣本曝曬法81抽氣法91差值10差別百分率17.4621..4524.0737.9316.6737.7025..99抽氣法值-曝曬法值)抽氣法值!100相關與殘差剖析對通過兩種方式測得的相對濁度率值進行相關剖析得出,兩組數據的相關性達到極明顯水平,其相關系數達到0.937,說明這兩種方式考察動物膜透性變化具有高度一致性.殘差剖析結果顯示(進一步說明兩種方式分別測得的兩組樣本相對濁度率值之間的整體差別不大,即兩種方式在現有數據樣本剖析基礎上完全可以取代.還不足以以現有數據為基礎確立兩種方式之間的線性關系,有待于進一步研究.兩種方式所獲數據之間的殘差剖析結果平方和自由度合計92427討論與推論依據以上相對濁度率的原始結果,以及對結果進行相關剖析和殘差剖析,得出:簡易曝曬法與復雜抽氣法測定值之間存在極明顯相關關系,兩組測定值之間差別不明顯,可以取代使用.曝曬法因為降低了人工操作程序,才能降低操作偏差,更有利于實驗結果的彰顯.對比試驗數據發覺抽氣法測定值低于曝曬法測定其主要誘因可能是動物莖稈抽氣后完全浸入于水底,電解質滲出更完全。
動物相對濁度率是反映動物細胞膜透性的一項基本指標,在動物生理學試驗中有著重要的作用,其反映的是一個相對值,通常測定主要用于研究動物細胞膜透性的變化趨勢,本研究表明曝曬法和抽氣法測定動物相對濁度率值表現出了相同的變化趨勢,因而用曝曬法取代傳統真空抽氣法測定動物相對濁度率值是可行的,于本實驗采用實驗樣本量少,本結果驗證的簡易曝曬法與傳統抽氣法之間的取代僅供參考使用,建議今后進一步以更多樣本為實驗材料進行驗證實驗,并對不同曝曬時間處理進行驗證,篩選適合曝曬時間.廣州教育大學學報第30中國科大學北京動物生理研究所,北京市動物生理學會.現代動物生理學實驗手冊[上海:科學出1999:.動物生理學實驗指導(第二版)上海:華東理工學院出版社,2006:6466.滲透脅迫下多花黑麥草葉內二溴化物酶活性和脯谷氨酸濃度以及質膜相對透性的變化[動物生理學通信,2000,36廣州市動物生理學會.動物生理學實驗指南[北京:北京科學技術出社,1985:6770.,sit,,,,,,,,,China):hisstudy,esrical.hecorrelweenionedhetwosametrendplantricalivit,ionbetween.ore,agesing
