鐵死亡是一種鐵依賴性細(xì)胞死亡方式，不同于自噬、壞死和自噬，涉及不同的生物途徑和生理過程。
這些非自噬性細(xì)胞死亡首次于 2003 年在選擇性殺死癌細(xì)胞的小分子篩選中被發(fā)現(xiàn) (1)。 由于它們對(duì)鐵的依賴，它們即將在 2012 年被命名為鐵死亡 (2)。
鐵死亡的標(biāo)志性特征包括脂質(zhì)二溴化和鐵沉積，最終導(dǎo)致二溴蘆丁酶 (GPX4) 活性增加，從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡 (3)。 鐵死亡是由于二溴蘆丁酶活性增加，導(dǎo)致細(xì)胞抗氧化能力下降和脂質(zhì)活性氧積累所致。
一些研究表明，鐵死亡與多種癌癥的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，包括缺血再灌注和腎損傷、神經(jīng)系統(tǒng)癌癥、癌癥和血液系統(tǒng)疾病。
鐵死亡特征
鐵死亡主要有以下特點(diǎn)：
1）細(xì)胞內(nèi)蘆丁（GSH）的崩潰和GPX4活性的增加導(dǎo)致脂質(zhì)二溴化的減少。
2）細(xì)胞內(nèi)二價(jià)鐵的積累通過反應(yīng)促進(jìn)脂質(zhì)的二溴化。
鐵死亡與自噬、壞死、凋亡的形態(tài)特征及調(diào)控因素比較（4）
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為此，測(cè)量氧化應(yīng)激、脂質(zhì)二溴化、谷胱甘肽和鐵的試劑，以及檢查線粒體結(jié)構(gòu)和脂質(zhì)沉積的試劑，可用于鐵死亡研究，并可用于分離這些鐵依賴性細(xì)胞死亡自噬和壞死。
通過細(xì)胞功能探針測(cè)量鐵死亡
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氧化應(yīng)激和 ROS 檢查
鐵死亡的特征是氧化應(yīng)激普遍減少以及特定活性氧（ROS）（例如烷基自由基、超氧化物、過氧羥基自由基和溴化二氫）的鐵依賴性積累的發(fā)生。 氧化應(yīng)激和活性氧減少會(huì)導(dǎo)致脂質(zhì)二溴化，這是鐵死亡的標(biāo)志細(xì)胞膜損傷，并導(dǎo)致細(xì)胞和組織損傷細(xì)胞膜損傷，特別是細(xì)胞膜損傷。 細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激的熒光指標(biāo)（包括試劑和）以及超氧化物和溴化二氫的特異性ROS指標(biāo)可以測(cè)量氧化應(yīng)激和ROS的減少情況。
脂質(zhì)二溴探針
脂質(zhì)中活性氧的積累和鐵死亡中蘆丁二溴化酶活性的增加導(dǎo)致鐵對(duì)脂質(zhì)二溴化的減少。 脂質(zhì)二溴化是脂質(zhì)的氧化降解，可導(dǎo)致細(xì)胞膜損傷。 鐵死亡中脂質(zhì)二溴化的減少可以通過使用?脂質(zhì)探針的百分比計(jì)熒光測(cè)定法和使用Click-iT?脂質(zhì)二溴化成像試劑盒的點(diǎn)擊反應(yīng)來測(cè)量。 酸氧化。
蘆丁檢查
細(xì)胞內(nèi)蘆丁（GSH）通常通過減少活性氧來發(fā)揮抗氧化作用，但其活性在鐵死亡期間增加，引起氧化應(yīng)激并減少損傷。 由于 GSH 是細(xì)胞中主要的游離胺，因此用于測(cè)量乙酸鹽的化合物（包括一氯二胺和一溴二苯乙炔）可用于檢測(cè)與鐵死亡相關(guān)的細(xì)胞內(nèi) GSH 水平的增加。 熒光和比色多孔板測(cè)定也可用于定量細(xì)胞裂解物或其他樣品中的蘆丁水平。
鐵指示劑
鐵死亡是一種鐵依賴性過程，鐵通過該過程導(dǎo)致二溴蘆丁酶活性增加和脂質(zhì)二溴化減少。 熒光重金屬指示劑（例如 和 ）可用于測(cè)量細(xì)胞中的鐵，其中 Fe2+ 或 Fe3+ 存在時(shí)會(huì)發(fā)生熒光猝滅。
細(xì)胞器探針
細(xì)胞器與多種鐵死亡途徑有關(guān)，包括線粒體（體積增加、膜密度降低和嵴損失）、溶酶體、高爾邊界和葉綠體。 細(xì)胞結(jié)構(gòu)探針可用于研究鐵死亡過程中細(xì)胞器結(jié)構(gòu)和功能的變化。
酶和代謝物
鐵死亡涉及的酶和代謝物，例如丁酸鹽和尿酸，可以通過基于紅色和尿酸的熒光多孔板實(shí)驗(yàn)來測(cè)量。
其他細(xì)胞功能指標(biāo)
在研究鐵死亡時(shí)，還可以測(cè)量其他細(xì)胞功能，包括細(xì)胞增殖、活力和細(xì)胞周期，或區(qū)分鐵死亡引起的細(xì)胞死亡與自噬或凋亡。
通過抗原測(cè)量鐵死亡
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參考
1. 卓瑪，S.，SL，哈恩，WC，和，BR (2003)。 在人類腫瘤細(xì)胞中的使用。 第 3 單元，285–296。
2. Dixon, SJ,, KM,, MR,, R.,, EM,, CE, Patel, DN, Bauer, AJ,, AM, Yang, WS 等人。 (2012).:細(xì)胞死亡的鐵形式., 1060–1072。
3. Li, J., Cao, F., Yin, H., Huang, Z., Lin, Z., Mao, N., Sun, B., and Wang, G. (2020).：過去和。 細(xì)胞死亡 & 11.
4. Chen, X.、Yu, C.、Kang, R. 和 Tang, D. (2020)。 鐵寧。 在。
鐵死亡研究的熱門試劑
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