鐵死亡是一種鐵依賴性細胞死亡方式，不同于自噬、壞死和自噬，涉及不同的生物途徑和生理過程。
這些非自噬性細胞死亡首次于 2003 年在選擇性殺死癌細胞的小分子篩選中被發(fā)現(xiàn) (1)。 由于它們對鐵的依賴，它們即將在 2012 年被命名為鐵死亡 (2)。
鐵死亡的標志性特征包括脂質(zhì)二溴化和鐵沉積，最終導(dǎo)致二溴蘆丁酶 (GPX4) 活性增加，從而導(dǎo)致細胞死亡 (3)。 鐵死亡是由于二溴蘆丁酶活性增加，導(dǎo)致細胞抗氧化能力下降和脂質(zhì)活性氧積累所致。
一些研究表明，鐵死亡與多種癌癥的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，包括缺血再灌注和腎損傷、神經(jīng)系統(tǒng)癌癥、癌癥和血液系統(tǒng)疾病。
鐵死亡特征
鐵死亡主要有以下特點：
1）細胞內(nèi)蘆丁（GSH）的崩潰和GPX4活性的增加導(dǎo)致脂質(zhì)二溴化的減少。
2）細胞內(nèi)二價鐵的積累通過反應(yīng)促進脂質(zhì)的二溴化。
鐵死亡與自噬、壞死、凋亡的形態(tài)特征及調(diào)控因素比較（4）
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為此，測量氧化應(yīng)激、脂質(zhì)二溴化、谷胱甘肽和鐵的試劑，以及檢查線粒體結(jié)構(gòu)和脂質(zhì)沉積的試劑，可用于鐵死亡研究，并可用于分離這些鐵依賴性細胞死亡自噬和壞死。
通過細胞功能探針測量鐵死亡
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氧化應(yīng)激和 ROS 檢查
鐵死亡的特征是氧化應(yīng)激普遍減少以及特定活性氧（ROS）（例如烷基自由基、超氧化物、過氧羥基自由基和溴化二氫）的鐵依賴性積累的發(fā)生。 氧化應(yīng)激和活性氧減少會導(dǎo)致脂質(zhì)二溴化，這是鐵死亡的標志細胞膜損傷，并導(dǎo)致細胞和組織損傷細胞膜損傷，特別是細胞膜損傷。 細胞內(nèi)氧化應(yīng)激的熒光指標（包括試劑和）以及超氧化物和溴化二氫的特異性ROS指標可以測量氧化應(yīng)激和ROS的減少情況。
脂質(zhì)二溴探針
脂質(zhì)中活性氧的積累和鐵死亡中蘆丁二溴化酶活性的增加導(dǎo)致鐵對脂質(zhì)二溴化的減少。 脂質(zhì)二溴化是脂質(zhì)的氧化降解，可導(dǎo)致細胞膜損傷。 鐵死亡中脂質(zhì)二溴化的減少可以通過使用?脂質(zhì)探針的百分比計熒光測定法和使用Click-iT?脂質(zhì)二溴化成像試劑盒的點擊反應(yīng)來測量。 酸氧化。
蘆丁檢查
細胞內(nèi)蘆丁（GSH）通常通過減少活性氧來發(fā)揮抗氧化作用，但其活性在鐵死亡期間增加，引起氧化應(yīng)激并減少損傷。 由于 GSH 是細胞中主要的游離胺，因此用于測量乙酸鹽的化合物（包括一氯二胺和一溴二苯乙炔）可用于檢測與鐵死亡相關(guān)的細胞內(nèi) GSH 水平的增加。 熒光和比色多孔板測定也可用于定量細胞裂解物或其他樣品中的蘆丁水平。
鐵指示劑
鐵死亡是一種鐵依賴性過程，鐵通過該過程導(dǎo)致二溴蘆丁酶活性增加和脂質(zhì)二溴化減少。 熒光重金屬指示劑（例如 和 ）可用于測量細胞中的鐵，其中 Fe2+ 或 Fe3+ 存在時會發(fā)生熒光猝滅。
細胞器探針
細胞器與多種鐵死亡途徑有關(guān)，包括線粒體（體積增加、膜密度降低和嵴損失）、溶酶體、高爾邊界和葉綠體。 細胞結(jié)構(gòu)探針可用于研究鐵死亡過程中細胞器結(jié)構(gòu)和功能的變化。
酶和代謝物
鐵死亡涉及的酶和代謝物，例如丁酸鹽和尿酸，可以通過基于紅色和尿酸的熒光多孔板實驗來測量。
其他細胞功能指標
在研究鐵死亡時，還可以測量其他細胞功能，包括細胞增殖、活力和細胞周期，或區(qū)分鐵死亡引起的細胞死亡與自噬或凋亡。
通過抗原測量鐵死亡
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參考
1. 卓瑪，S.，SL，哈恩，WC，和，BR (2003)。 在人類腫瘤細胞中的使用。 第 3 單元，285–296。
2. Dixon, SJ,, KM,, MR,, R.,, EM,, CE, Patel, DN, Bauer, AJ,, AM, Yang, WS 等人。 (2012).:細胞死亡的鐵形式., 1060–1072。
3. Li, J., Cao, F., Yin, H., Huang, Z., Lin, Z., Mao, N., Sun, B., and Wang, G. (2020).：過去和。 細胞死亡 & 11.
4. Chen, X.、Yu, C.、Kang, R. 和 Tang, D. (2020)。 鐵寧。 在。
鐵死亡研究的熱門試劑
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