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備課素材:為何用鈣離子處理大腸球菌易使其處于感受態(tài)2022

更新時間:2023-10-13 文章作者:佚名 信息來源:網(wǎng)絡整理 閱讀次數(shù):

為何用鈣離子處理大腸球菌易使其處于感受態(tài)人教2019版小學生物學選擇性選修三P82說,鈣離子處理大腸球菌細胞,使細胞處于能吸收環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)經(jīng)而處于感受態(tài):這些狀態(tài)也叫感受態(tài)。這么,為何用鈣離子處理大腸球菌易使其處于感受態(tài)?細胞還能從周圍環(huán)境中攝入DNA分子,而且不易被細胞內的限制性核苷酸內切酶分解時所處的一種特殊生理狀態(tài)稱感受態(tài)()。自然環(huán)境中真菌可以吸收外源遺傳物質以降低自身對環(huán)境的適應性。通常用理化方式誘導細胞,使其處于最適攝入和容納外來DNA的生理狀態(tài)。大腸弧菌是格蘭陽性,細胞壁就是肽聚糖+外膜(脂蛋白、脂質單層、脂寡糖)細胞膜選擇性通透,這些細胞壁結構不僅作為內毒素使機體發(fā)熱、白細胞降低之外(其實還可以因此真菌形態(tài)、耐藥性、結合Mg2+維持離子平衡),與細胞膜出現(xiàn)裂紋吸收DNA并沒有哪些關系。野生型大腸球菌并不容易轉化,這是因為DNA未能步入野生型大腸弧菌的細胞。經(jīng)過多年的努力,科學家們發(fā)覺了一種方式可以降低細胞吸收外源DNA的效率。那就是用物理方式處理細胞,使其改變膜對DNA的私密性。這些細胞就稱為感受態(tài)細胞,即細胞處于能攝取核苷酸分午時的生理狀態(tài)。這些方式早已成為基因工程的常規(guī)技術,它對于我們借助體外DNA重組技術來了解真核和原核生物的基因功能非常重要。jAK物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

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病菌的感受態(tài)有兩種類型:一種是自然感受態(tài)(),自然感受態(tài)真菌可以自由地吸收DNA,通過它來進行遺傳轉化;另一種是人工感受態(tài)(),在這些轉化中,真菌發(fā)生改變促使它們能攝取外源DNA。枯草芽孢球菌屬于才能發(fā)展為自然感受態(tài)的細胞,大腸弧菌就屬于須要人工處理的細胞。感受態(tài)真菌細胞的轉化采用硫酸鈣的技巧。主要原理就是通過處理使細胞的私密性變大,直觀的說,促使細胞膜表面出現(xiàn)一些凹坑,以便外源基因或載體步入感受態(tài)細胞。因為細胞膜的流動性,這些細縫會被細胞自身所修補:1、通過處理使細胞的私密性變大。2、使得細胞膜表面出現(xiàn)一些凹坑,以便外源基因或載體步入感受態(tài)細胞。3、由于細胞膜的流動性,這些細縫會被細胞自身所修補。其過程是:1.將快速生長的大腸球菌放在經(jīng)高溫(0℃)預處理的低滲碳酸鈣氨水中,便會導致細胞膨脹;Ca離子會使細胞膜磷脂雙分子層產(chǎn)生液晶結構,使得細胞外膜與內膜間隙中的部份核苷酸酶解離開來,離開所在區(qū)域,誘導細胞成為感受態(tài)細胞細胞膜私密性發(fā)生變化,極易與外源DNA相黏附并在細胞表面產(chǎn)生抗脫氧內質網(wǎng)核苷酸酶的烷基-乙酸鈣復合物。jAK物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

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聯(lián)合其它的二價金屬離子(如Mn、Co)、DMSO或還原劑等物質處理,可使轉化率提升100~1000倍。2.將該體系轉移到42℃下做短暫的熱剌激(90s),細胞膜的液晶結構會發(fā)生劇烈擾動,并隨機出現(xiàn)許多間隙,外源DNA就可能被細胞吸收。步入細胞的外源DNA分子通過復制、表達,實現(xiàn)遺傳信息的轉移,使受體細胞出現(xiàn)新的遺傳性狀。3.將轉化后的細胞在選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng),篩選出帶有外源DNA分子的陰性克隆。簡而言之,Ca離子使DNA沉淀于細胞表面(類似真核轉染的乙酸鈣共沉淀),0-42℃的熱沖擊促使膜表面出現(xiàn)裂紋(很快會被手動修補-疏水作用),極易與外源DNA相粘附并在細胞表面產(chǎn)生脫氧內質網(wǎng)核苷酸酶的甲基-乙酸鈣復合物,誘導細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子,而且所吸收的DNA分子不易被細胞內限制酶分解例、下列說法正確的是()A.細胞系泛稱可傳代的細胞,細胞株是具有特殊性質的細胞系B.用硫酸鈣處理大腸弧菌,降低大腸鏈球菌細胞壁的私密性,使富含目的基因的重組引物步入大腸球菌寄主細胞,所有的細胞都能接納重組DNA分子C.DNA聯(lián)接酶還能將任意2個DNA片斷聯(lián)接上去D.試管小孩的獲得過程屬于嚴格意義上的克隆解析:閱讀題干可知本題涉及的知識點是試管小孩、DNA聯(lián)接酶、動物細胞培養(yǎng)和目的基因導出微生物,梳理相關知識點,按照選項描述結合基礎知識作出判定.細胞系是無限增殖的細胞,細胞株是正常細胞群體細胞膜選擇性通透,A錯誤;將目的基因導出微生物體內,一般是用鈣離子處理使其弄成感受態(tài)細胞,B正確;DNA聯(lián)接酶可將具相同的黏性末端的兩DNA片斷聯(lián)接上去,C錯誤;試管小孩是有性生殖,而克隆是無性飼養(yǎng),D錯誤.故選:B.學科網(wǎng)(上海)股份有限公司$jAK物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

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