隨著社會(huì)老齡化的發(fā)展及生活質(zhì)量的提升，骨關(guān)節(jié)炎越來越遭到人們的注重。為了減輕關(guān)節(jié)腫痛及關(guān)節(jié)鏡放療中止痛的須要，臨床上常行關(guān)節(jié)腔內(nèi)利多卡因注射。國(guó)內(nèi)報(bào)道布比卡因關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射造成了關(guān)節(jié)骨膜的溶化，利多卡因?qū)﹃P(guān)節(jié)骨膜的安全性越來越導(dǎo)致人們的注重。關(guān)節(jié)骨膜是透明骨膜，覆蓋在構(gòu)成活動(dòng)關(guān)節(jié)的相對(duì)骨面。均勻傳遞負(fù)荷，擴(kuò)大關(guān)節(jié)負(fù)重面，緩沖回落，增加關(guān)節(jié)活動(dòng)時(shí)的摩擦。關(guān)節(jié)骨膜沒有血管、神經(jīng)和淋巴管，自我修補(bǔ)能力很差。關(guān)節(jié)骨膜主要由骨膜細(xì)胞和基質(zhì)構(gòu)成，其中軟骨細(xì)胞只占1％--10％，基質(zhì)的主要成分為水、蛋白黃酮和II型膠原。骨膜細(xì)胞合成和分泌蛋白黃酮和II型膠原，維持骨膜基質(zhì)的新陳代謝；基質(zhì)則圍繞在骨膜細(xì)胞周圍，使骨膜具有彈性和張力硬度。骨膜細(xì)胞和基質(zhì)互為存在的條件鈉離子鉀離子通道阻滯劑，骨膜細(xì)胞的自噬和壞死會(huì)影響基質(zhì)的合成和分泌；基質(zhì)的損毀將造成骨膜細(xì)胞的破壞。在正常情況下，基質(zhì)更新的速率很慢,基質(zhì)的合成和分泌處于動(dòng)態(tài)平衡中，并受多種因子的調(diào)控，如MMPs與TIMPs的動(dòng)態(tài)平衡是保證生理狀態(tài)下基質(zhì)正常更新改造的關(guān)鍵，一旦平衡破壞則引起各類病理過程。骨膜細(xì)胞是非激動(dòng)細(xì)胞，細(xì)胞膜上存在的多種離子通道是細(xì)胞進(jìn)行各類生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)：轉(zhuǎn)運(yùn)細(xì)胞代謝必需的離子；調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外滲透壓；參與電沖動(dòng)產(chǎn)生；參與訊號(hào)傳遞，使有機(jī)體更好地適應(yīng)環(huán)境條件。
離子通道的活性受多種調(diào)控誘因的調(diào)節(jié)，有多種興奮劑與阻斷劑:如利多卡因、河豚毒特異性地阻斷Na+通道，四嗎啉選擇性地阻斷K+通道。利多卡因是選擇性Na+通道阻滯劑，才能選擇性地阻斷電流門控式Na+通道，抑制Na+內(nèi)流，同時(shí)對(duì)K+通道也有阻斷作用。導(dǎo)致靜息膜電位上升，使H+、Ca2+在細(xì)胞膜內(nèi)外電流梯度的影響下內(nèi)流降低，PH值增加；同時(shí)因?yàn)榧?xì)胞滲透壓增加，細(xì)胞功能損壞。有文獻(xiàn)報(bào)道當(dāng)利多卡因干預(yù)含量達(dá)0.1mmol/L時(shí)，即可阻斷骨膜細(xì)胞Na+通道，干預(yù)含量小于2.5mmol/L、時(shí)間超過48小時(shí)觀察到有細(xì)胞出現(xiàn)自噬現(xiàn)象，并覺得細(xì)胞自噬源于利多卡因的細(xì)胞毒性作用鈉離子鉀離子通道阻滯劑，并由此提出利多卡因時(shí)間及含量依賴的細(xì)胞毒性作用的理論。鑒于此，我們希望通過體內(nèi)及體外實(shí)驗(yàn)觀察接近臨床含量的利多卡因作用于兔膝關(guān)節(jié)骨膜細(xì)胞時(shí)骨膜細(xì)胞的活性、基質(zhì)的合成及分泌、炎性因子分泌以及關(guān)節(jié)骨膜形態(tài)的變化，以期獲得有益于臨床的資料，防止醫(yī)源性的關(guān)節(jié)骨膜損害。目的：為了進(jìn)一步闡明電流門控式Na+通道阻滯劑利多卡因?qū)﹃P(guān)節(jié)骨膜的影響，我們?cè)O(shè)計(jì)了不同含量、不同作用期限下利多卡因干預(yù)骨膜細(xì)胞的體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)，通過測(cè)定各類條件下關(guān)節(jié)骨膜細(xì)胞活性、細(xì)胞外基質(zhì)合成、分泌、炎性因子濃度及關(guān)節(jié)骨膜形態(tài)的變化，探索利多卡因安全含量、劑量及療程，以期為臨床應(yīng)用提供借鑒。
方式：2月齡法國(guó)大白兔56只，隨機(jī)分為體外實(shí)驗(yàn)組和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)組。體外實(shí)驗(yàn)組：空氣溶栓誅殺。無菌放療切取雙膝關(guān)節(jié)骨膜，分離關(guān)節(jié)骨膜細(xì)胞。不同含量、不同時(shí)限利多卡因干預(yù)骨膜細(xì)胞，用流式細(xì)胞儀測(cè)量骨膜細(xì)胞自噬率；ELISA法測(cè)量骨膜細(xì)胞分泌Ⅱ型膠原、GAG及MMP-3、TIMP-1的濃度；RT-PCR檢查骨膜細(xì)胞內(nèi)Ⅱ型膠原、Mrna的抒發(fā)。并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)剖析。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)組：在兔膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注入接近臨床對(duì)應(yīng)含量的利多卡因0.5ml，每周一次，分別于注射4周、12周、24周后，采取空氣溶栓處決植物，通過大體觀察、組織切塊、免疫組化等方式觀察鳥類關(guān)節(jié)骨膜的變化；另外單次關(guān)節(jié)腔注射后，分別在注射后第1、2、4、8天檢查關(guān)節(jié)骨膜組織Ⅱ型膠原、Mrna的抒發(fā)，之后對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)剖析。結(jié)果：體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果1：利多卡因誘發(fā)骨膜細(xì)胞自噬具有顯著的時(shí)間依賴性和含量依賴性。2.5mmol/L利多卡因干預(yù)骨膜細(xì)胞，觀察72小時(shí)無顯著自噬。2：0.2mmol/L、2mmol/L利多卡因干預(yù)骨膜細(xì)胞，0.2mmol/L組初期（第3天）抑制GAG分泌，晚期（第9天）GAG分泌顯著降低(p0.05)。
2mmol/L組較對(duì)照組GAG及Ⅱ型膠原的分泌稍降低(p>0.05)。3：0.2mmol/L、2mmol/L利多卡因干預(yù)骨膜細(xì)胞，0.2mmol/L組初期（第3天）抑制MMP-3分泌，晚期（第9天）MMP-3與對(duì)照組相比分泌顯著降低(p0.05)。2mmol/L組骨膜細(xì)胞培養(yǎng)液中MMP-3濃度與對(duì)照組相比顯著降低(p0.05)。4:2mmol/L利多卡因干預(yù)骨膜細(xì)胞，Ⅱ型膠原Mrna的抒發(fā)較對(duì)照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別；初期（第3天）抑制Mrna的抒發(fā)，晚期（第9天）Mrna與對(duì)照組相比抒發(fā)顯著降低(p