隨著社會老齡化的發(fā)展及生活質量的提升，骨關節(jié)炎越來越遭到人們的注重。為了減輕關節(jié)腫痛及關節(jié)鏡放療中止痛的須要，臨床上常行關節(jié)腔內利多卡因注射。國內報道布比卡因關節(jié)腔內注射造成了關節(jié)骨膜的溶化，利多卡因對關節(jié)骨膜的安全性越來越導致人們的注重。關節(jié)骨膜是透明骨膜，覆蓋在構成活動關節(jié)的相對骨面。均勻傳遞負荷，擴大關節(jié)負重面，緩沖回落，增加關節(jié)活動時的摩擦。關節(jié)骨膜沒有血管、神經和淋巴管，自我修補能力很差。關節(jié)骨膜主要由骨膜細胞和基質構成，其中軟骨細胞只占1％--10％，基質的主要成分為水、蛋白黃酮和II型膠原。骨膜細胞合成和分泌蛋白黃酮和II型膠原，維持骨膜基質的新陳代謝；基質則圍繞在骨膜細胞周圍，使骨膜具有彈性和張力硬度。骨膜細胞和基質互為存在的條件鈉離子鉀離子通道阻滯劑，骨膜細胞的自噬和壞死會影響基質的合成和分泌；基質的損毀將造成骨膜細胞的破壞。在正常情況下，基質更新的速率很慢,基質的合成和分泌處于動態(tài)平衡中，并受多種因子的調控，如MMPs與TIMPs的動態(tài)平衡是保證生理狀態(tài)下基質正常更新改造的關鍵，一旦平衡破壞則引起各類病理過程。骨膜細胞是非激動細胞，細胞膜上存在的多種離子通道是細胞進行各類生命活動的物質基礎：轉運細胞代謝必需的離子；調節(jié)細胞內外滲透壓；參與電沖動產生；參與訊號傳遞，使有機體更好地適應環(huán)境條件。
離子通道的活性受多種調控誘因的調節(jié)，有多種興奮劑與阻斷劑:如利多卡因、河豚毒特異性地阻斷Na+通道，四嗎啉選擇性地阻斷K+通道。利多卡因是選擇性Na+通道阻滯劑，才能選擇性地阻斷電流門控式Na+通道，抑制Na+內流，同時對K+通道也有阻斷作用。導致靜息膜電位上升，使H+、Ca2+在細胞膜內外電流梯度的影響下內流降低，PH值增加；同時因為細胞滲透壓增加，細胞功能損壞。有文獻報道當利多卡因干預含量達0.1mmol/L時，即可阻斷骨膜細胞Na+通道，干預含量小于2.5mmol/L、時間超過48小時觀察到有細胞出現自噬現象，并覺得細胞自噬源于利多卡因的細胞毒性作用鈉離子鉀離子通道阻滯劑，并由此提出利多卡因時間及含量依賴的細胞毒性作用的理論。鑒于此，我們希望通過體內及體外實驗觀察接近臨床含量的利多卡因作用于兔膝關節(jié)骨膜細胞時骨膜細胞的活性、基質的合成及分泌、炎性因子分泌以及關節(jié)骨膜形態(tài)的變化，以期獲得有益于臨床的資料，防止醫(yī)源性的關節(jié)骨膜損害。目的：為了進一步闡明電流門控式Na+通道阻滯劑利多卡因對關節(jié)骨膜的影響，我們設計了不同含量、不同作用期限下利多卡因干預骨膜細胞的體內和體外實驗，通過測定各類條件下關節(jié)骨膜細胞活性、細胞外基質合成、分泌、炎性因子濃度及關節(jié)骨膜形態(tài)的變化，探索利多卡因安全含量、劑量及療程，以期為臨床應用提供借鑒。
方式：2月齡法國大白兔56只，隨機分為體外實驗組和體內實驗組。體外實驗組：空氣溶栓誅殺。無菌放療切取雙膝關節(jié)骨膜，分離關節(jié)骨膜細胞。不同含量、不同時限利多卡因干預骨膜細胞，用流式細胞儀測量骨膜細胞自噬率；ELISA法測量骨膜細胞分泌Ⅱ型膠原、GAG及MMP-3、TIMP-1的濃度；RT-PCR檢查骨膜細胞內Ⅱ型膠原、Mrna的抒發(fā)。并對結果進行統(tǒng)計剖析。體內實驗組：在兔膝關節(jié)腔內注入接近臨床對應含量的利多卡因0.5ml，每周一次，分別于注射4周、12周、24周后，采取空氣溶栓處決植物，通過大體觀察、組織切塊、免疫組化等方式觀察鳥類關節(jié)骨膜的變化；另外單次關節(jié)腔注射后，分別在注射后第1、2、4、8天檢查關節(jié)骨膜組織Ⅱ型膠原、Mrna的抒發(fā)，之后對結果進行統(tǒng)計剖析。結果：體外實驗結果1：利多卡因誘發(fā)骨膜細胞自噬具有顯著的時間依賴性和含量依賴性。2.5mmol/L利多卡因干預骨膜細胞，觀察72小時無顯著自噬。2：0.2mmol/L、2mmol/L利多卡因干預骨膜細胞，0.2mmol/L組初期（第3天）抑制GAG分泌，晚期（第9天）GAG分泌顯著降低(p0.05)。
2mmol/L組較對照組GAG及Ⅱ型膠原的分泌稍降低(p>0.05)。3：0.2mmol/L、2mmol/L利多卡因干預骨膜細胞，0.2mmol/L組初期（第3天）抑制MMP-3分泌，晚期（第9天）MMP-3與對照組相比分泌顯著降低(p0.05)。2mmol/L組骨膜細胞培養(yǎng)液中MMP-3濃度與對照組相比顯著降低(p0.05)。4:2mmol/L利多卡因干預骨膜細胞，Ⅱ型膠原Mrna的抒發(fā)較對照組無統(tǒng)計學差別；初期（第3天）抑制Mrna的抒發(fā)，晚期（第9天）Mrna與對照組相比抒發(fā)顯著降低(p
