明視野顯微鏡是一種常見(jiàn)的顯微鏡檢查方法，廣泛應(yīng)用于病理學(xué)和檢查中觀察染色切片。 所有顯微鏡都可以完成這個(gè)功能。
2.暗視野觀察（Dark field DF）
暗場(chǎng)實(shí)際上是暗場(chǎng)照明。 其特點(diǎn)與明場(chǎng)不同。 它不直接觀察照明光，而是觀察被檢查物體反射或衍射的光。 因此，視野變成黑暗的背景，而被檢查的物體則呈現(xiàn)明亮的圖像。
暗場(chǎng)的原理基于光學(xué)廷代爾現(xiàn)象。 當(dāng)強(qiáng)光直接穿過(guò)灰塵時(shí)，人眼無(wú)法觀察到。 這是由強(qiáng)光的衍射引起的。 如果你用光線傾斜地照射它，由于光的反射，顆粒的尺寸似乎會(huì)增加，使得它們對(duì)人眼可見(jiàn)。
暗場(chǎng)觀察所需的特殊配件是暗場(chǎng)聚光鏡。 其特點(diǎn)是不讓光束從下往上穿過(guò)被檢查物體，而是改變光路，使其斜向被檢查物體偏光顯微鏡觀察方法主要有哪些，使照明光不直接進(jìn)入被檢查物體。物鏡，利用被檢物體表面的反射或衍射光形成明亮的圖像。 暗場(chǎng)觀察的分辨率遠(yuǎn)高于明場(chǎng)觀察，可達(dá)0.02-0.004
3. 相差顯微鏡（Phase PH）
在光學(xué)顯微鏡的發(fā)展過(guò)程中，相差顯微鏡的成功發(fā)明是現(xiàn)代顯微技術(shù)的一項(xiàng)重要成就。我們知道，人眼只能辨別光波的波長(zhǎng)（顏色）和振幅（亮度）。 對(duì)于無(wú)色透明的生物標(biāo)本，光線通過(guò)時(shí)，波長(zhǎng)和振幅變化不大，在明視場(chǎng)觀察中很難觀察到標(biāo)本。
。 相襯顯微鏡是利用被檢物體光路的差異進(jìn)行顯微檢查，即有效利用光的干涉現(xiàn)象，將人眼無(wú)法區(qū)分的相位差轉(zhuǎn)變?yōu)榭蓞^(qū)分的幅度差，即使對(duì)于無(wú)色透明物質(zhì)。 可以變得清晰可見(jiàn)。 這極大地方便了活細(xì)胞的觀察，因此相差顯微鏡廣泛應(yīng)用于倒置顯微鏡中。
相差顯微鏡的基本原理是將可見(jiàn)光透過(guò)標(biāo)本的光程差轉(zhuǎn)化為振幅差，從而提高各種結(jié)構(gòu)之間的對(duì)比度，使各種結(jié)構(gòu)清晰可見(jiàn)。 光線穿過(guò)標(biāo)本后發(fā)生折射，偏離原來(lái)的光路，并被延遲1/4λ（波長(zhǎng)）。 如果增加或減少1/4λ，則光程差變?yōu)?/2λ，兩束光束合并后發(fā)生干涉。 加強(qiáng)、增加或減少振幅、增加對(duì)比度。 從結(jié)構(gòu)上來(lái)說(shuō)，相差顯微鏡有兩個(gè)不同于普通光學(xué)顯微鏡的特殊之處：
1. 環(huán)形光闌 ( ) 位于光源和聚光鏡之間。 其作用是使通過(guò)聚光鏡的光線形成空心光錐并聚焦在標(biāo)本上。
2、相位板（ ） 在物鏡上添加了涂有氟化鎂的相位板，可以使直射光或衍射光的相位延遲1/4λ。 分為兩種：
1. A+相位板：將直射光延遲1/4λ。 兩組光波合成后，光波相加，振幅增大。 標(biāo)本結(jié)構(gòu)變得比周?chē)橘|(zhì)更亮，形成明亮對(duì)比度（或負(fù)對(duì)比度）。
2. B+相位板：使衍射光延遲1/4λ。 兩組光線組合后，光波相減，振幅變小，形成暗對(duì)比（或正對(duì)比），結(jié)構(gòu)變得比周?chē)橘|(zhì)更暗。
4. 微分干涉顯微鏡（DIC）
微分干涉顯微鏡出??現(xiàn)于 20 世紀(jì) 60 年代。 它不僅可以觀察無(wú)色透明的物體，而且圖像呈現(xiàn)出強(qiáng)烈的立體浮雕感。 它還具有相差顯微鏡無(wú)法達(dá)到的某些優(yōu)點(diǎn)，觀察效果更好。 逼真。
原則;
微分干涉顯微鏡使用特殊的沃拉斯頓棱鏡來(lái)分解光束。 分裂梁的振動(dòng)方向相互垂直且強(qiáng)度相等。 光束在彼此非常接近的兩個(gè)點(diǎn)處穿過(guò)被檢查的物體，但相位略有不同。 由于兩束光束之間的分光距離極小，因此不會(huì)出現(xiàn)重影現(xiàn)象，使圖像呈現(xiàn)三維效果。
DIC顯微鏡的物理原理與相差顯微鏡完全不同，技術(shù)設(shè)計(jì)也復(fù)雜得多。 DIC使用偏振光，有四個(gè)特殊的光學(xué)元件：起偏器（）、DIC棱鏡、DIC滑翔機(jī)和檢偏器（）。 起偏器直接安裝在聚光系統(tǒng)前面，使光線發(fā)生線偏振。 羅馬斯棱鏡或 DIC 棱鏡安裝在聚光鏡中。 這種棱鏡可以將一束光分解成兩束偏振方向不同的光（x和y），并且兩者形成一個(gè)小角度。 聚光鏡使兩束光束平行于顯微鏡的光軸。 最初，兩束光具有相同的相位。 在穿過(guò)試樣的相鄰區(qū)域后，由于試樣的厚度和折射率不同，兩束光之間會(huì)產(chǎn)生光程差。 第二個(gè)羅馬棱鏡，即 DIC 滑翔機(jī)，安裝在物鏡的后焦平面上，它將兩種光波合二為一。
此時(shí)，兩束光的偏振面（x和y）仍然存在。 最后，光束穿過(guò)第二個(gè)偏振裝置，即檢偏器。 在光束在目鏡中形成 DIC 圖像之前，檢偏器與偏振器成直角。 分析器將兩個(gè)垂直的光波組合成具有相同偏振平面的兩束光束，使它們發(fā)生干涉。 x 波和 y 波之間的光程差決定了傳輸?shù)墓饬俊?當(dāng)光程差為0時(shí)，沒(méi)有光通過(guò)檢偏器； 當(dāng)光程差等于波長(zhǎng)的一半時(shí)偏光顯微鏡觀察方法主要有哪些，通過(guò)的光達(dá)到最大值。 所以在灰色背景下，標(biāo)本結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)出明暗差異。 為了達(dá)到圖像的最佳對(duì)比度，可以通過(guò)調(diào)節(jié)DIC滑塊的縱向微調(diào)來(lái)改變光程差。 光程差可以改變圖像的亮度。調(diào)節(jié)DIC滑塊可以使標(biāo)本的細(xì)微結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)出正或負(fù)的投影圖像，通常一側(cè)亮，另一側(cè)暗。 這會(huì)產(chǎn)生標(biāo)本的人造三維印象，類(lèi)似于大理石上的浮雕。
5.偏光顯微鏡（POL）
偏光顯微鏡的特點(diǎn)
偏光顯微鏡是用來(lái)鑒定物質(zhì)精細(xì)結(jié)構(gòu)光學(xué)性質(zhì)的顯微鏡。 任何具有雙折射的物質(zhì)都可以在偏光顯微鏡下清晰地區(qū)分。 當(dāng)然，這些物質(zhì)也可以用染過(guò)的頭發(fā)觀察到，但有些是不可能的，必須使用偏光顯微鏡。
偏光顯微鏡的特點(diǎn)是將普通光轉(zhuǎn)變?yōu)槠窆膺M(jìn)行顯微鏡檢查，以鑒定某種物質(zhì)是單折射（各向同性）還是雙折射（各向異性）。
雙折射是晶體的基本性質(zhì)。 因此，偏光顯微鏡廣泛應(yīng)用于礦物、化學(xué)等領(lǐng)域。 它在生物學(xué)和植物學(xué)中也有應(yīng)用。
6. 浮雕相差顯微鏡（RC HMC）
1975年，博士發(fā)明
2002年，專(zhuān)利到期，各顯微鏡制造商推出了采用RC技術(shù)的以自己命名的產(chǎn)品。
原則
斜光照射標(biāo)本產(chǎn)生折射和衍射。 光線通過(guò)物鏡的光密度梯度調(diào)節(jié)器產(chǎn)生不同的陰影，從而在透明標(biāo)本表面產(chǎn)生明暗差異，增加觀察對(duì)比度。
特征
提高未染色標(biāo)本的可見(jiàn)度和對(duì)比度；
圖像顯示陰影或近似三維結(jié)構(gòu)，無(wú)光暈；
可檢測(cè)雙折射材料（巖片、晶體、骨頭）；
可檢測(cè)玻璃、塑料等培養(yǎng)皿中的細(xì)胞、器官和組織；
聚光鏡的工作距離可以設(shè)計(jì)得更長(zhǎng)；
RC 物鏡還可用于明場(chǎng)、暗場(chǎng)和熒光觀察
7：熒光顯微鏡（FL）
熒光顯微鏡利用短波長(zhǎng)光照射被熒光素染色的物體，使其被激發(fā)產(chǎn)生長(zhǎng)波長(zhǎng)熒光，然后進(jìn)行觀察。
優(yōu)勢(shì)：
? 高檢測(cè)能力（放大）
? 對(duì)細(xì)胞刺激小（可體內(nèi)染色）
? 能夠進(jìn)行多次染色
使用：
? 觀察物體結(jié)構(gòu)——熒光素
? 比較熒光的有無(wú)和色調(diào)來(lái)識(shí)別物質(zhì) - 抗體熒光等。
? 測(cè)量熒光量以進(jìn)行物質(zhì)的定性和定量分析
