免疫染色通透液()(with,俗稱
with),可以用于免疫染色等多種原位測量時細胞樣品、冰凍或石蠟切塊的通透處理,有助于曝露抗體、核酸等作用靶向,使抗原、探針或標記物等更容易步入細胞內,進而確保染色等的測量療效。本產品為即用型工作液,可以直接使用,無需稀釋。
本產品通透能力較強,推薦用于各類常規的免疫螢光、免疫組化、免疫細胞物理、流式檢查等中細胞的通透,非常適宜細胞膜蛋白的測量。本產品不會溶化細胞膜,不會影響流式檢查時的光散射。但本產品不推薦用于測量細胞核及線粒體內的蛋白。對于通透療效要求不高的情況,也可以使用碧云天的免疫染色漂洗液(P0106,,)或免疫染色通透液(X-100)(P0096)。對于通透要求比較高的情況,可以使用免疫染色強力通透液(P0097)。對于凝集素()的測量推薦使用免疫染色通透液(X-100)(P0096)或免疫染色強力通透液(P0097)。
通透液一般可以通過使用有機溶劑比如乙醇、丙酮等,或則使用去垢劑比如X-100、等來實現對于細胞膜的通透。乙醇或乙醇等有機溶劑,一方面可以溶化細胞膜和核膜因而充分曝露細胞漿和細胞核中的目的蛋白等,另一方面也可以使細胞內的蛋白變性起到固定的作用。乙醇或乙醇等有機試劑操作比較簡單,一步處理可以同時實現固定和通透,缺點是膜蛋白也會被溶化掉而且有些蛋白變性后不利于后續的測量,因而有機溶劑使用相對較少,僅用于一些要求比較粗糙的測量。X-100是常用的通透試劑,可以通透細胞膜和核膜,作用的原理也是非特異性地溶化細胞膜,因而其缺點是不利于膜蛋白的檢查,但當使用多聚甲醛進行交聯和固定后,相當一部份膜蛋白會被交聯固定,因而不會被X-100溶化,因而后續依然能測量到。
可以特異性地溶化細胞膜中的尿酸,進而實現在細胞膜上選擇性地打孔,其優點是適宜于細胞膜蛋白的檢查,非常適宜通過流式細胞儀測量細胞膜上的標志性蛋白,缺點是對于一些尿酸濃度低的細胞通透療效差,通透療效弱于X-100和有機溶劑,但是不能通透尿酸濃度很低的核膜和線粒體膜。對于凝集素()的檢查,含X-100等非特異性去垢劑的通透液的療效明顯優于主要含的通透液。
本免疫染色通透液()中富含等去垢劑細胞膜選擇性通透,配制在PBS中。經本免疫染色通透液()處理的樣品細胞膜選擇性通透,對于細胞膜目的蛋白的免疫染色測量結果表明,染色療效與常規的通透液相比基本一致或有明顯提高。
根據每位樣品須要0.1或1毫升免疫染色通透液()估算,一個100ml包裝的本產品可以通透1000個或100個樣品,一個500ml包裝的本產品可以通透5000個或500個樣品。
包裝清單:
產品編號
產品名稱
包裝
P0095-100ml
免疫染色通透液()
100ml
P0095-500ml
免疫染色通透液()
500ml
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說明書
1份
保存條件:
4℃保存,一年有效。-20℃可以常年保存,溫度保存一個月內有效。
注意事項:
本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床確診或醫治,不得用于乳品或藥品,不得儲存于普通住宅內。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。