細胞生物學實驗五細胞膜的私密性實驗13生物基地22015-04-29同組者:呂贊實驗原理細胞膜是細胞與環境進行物質交換的選擇私密性屏障,是一種半透膜,可選擇性地紅蛋釋放到介質中,濾液山不透明的紅細胞懸液變為白色透明的血紅蛋門堿液,這些現彖稱為溶血。因為溶質滲透入細胞的速率不同,溶血時間也不同,因而,發生溶血現象所需的時間長短可作為測址物質步入紅細胞速率的一種指標。木實驗選用紅細胞作為細胞膜滲透性的實驗材料,將其裝入不同的介質堿液小,觀察紅細胞的變化。溶血()紅細胞斷裂,血紅蛋白逸出稱紅細胞溶化,簡稱溶血。可由多種理化誘因和毒素造成。在體外,如低滲氨水、機械性強力振蕩、突然高溫冷藏(-20C?-25C)或忽然化凍、過酸或過堿,以及酒精、乙瞇、皂堿、膽堿鹽等均可導致溶血。喂奶植物血清的等滲堿液為0.9%NaCI堿液,紅細胞在高于0.45%NaCI堿液屮,因溶入,紅細胞膨脹而斷裂,血紅蛋白逸出。在體內,溶血可為溶血性真菌或個別蜂毒侵入、抗原抗原反應(如輸入配血不合的血液)、各種機械性損傷、紅細胞內在(膜、陷、某些藥?物等造成。溶血性真菌,如個別溶血性弧菌和產氣莢膜球菌可引起肺炎鏈球菌破壞紅細胞和個別溶血性蜂毒含卵磷脂酶,使血清或紅細胞的卵磷脂轉變為溶血卵磷脂,使紅細胞膜分解。
?材料雞血紅細胞試劑0.85%NaC氨水、0.8niol/L乙醇氨水、0.8mol/LM三醇氨水、6%獼猴桃糖氨水、2%-100器材試管、試管架、滴管、顯微鏡、離心機。取雞血6ml,加0.85%NaCl堿液4ml,在1000r/min條件下離心5分鐘;(RBC壓積量不中將上述離心后的紅細胞按沉淀量配成50%含量;(總體積應不多于1.2ml)每組取6支試管,分別加入如下堿液各3ml:85%NaCl堿液085%NaCl堿液3mol/L等滲)乙醇堿液8mol/L(03mol/L等滲)丙三醇堿液6%(5%等滲)獼猴桃糖堿液2%(1.5%等滲)-IOO向上述6支試管中分別加入50%紅細胞懸液1滴,輕搖混勻,觀察試管中是否有溶轉氨酶發生(觀察時間1小時),記錄溶血時間,并于顯微鏡下觀察各堿液的細胞。五、實驗結果85%NaCl堿液0.085%NaCl堿液08mol/L乙醇堿液2%-%獼猴桃糖堿液8mol/L丙三醇堿液編號堿液類型是否溶血溶血所須要的吋間結果剖析85%硫酸鈉堿液不溶血作比色用細胞膜選擇性通透,顏色灰白,混濁,不透明完全溶血3s堿液透明,顏色暗紅,因為含量較人細胞膜選擇性通透,細胞完全溶血完全溶血4s前期細胞部份溶血,之后細胞完全溶血部份溶血lOmin含量較小細胞部份溶血6%-100完全溶血2s表面活性劑,結果不顯著,氨水混濁,但顏色暗紅七、結果討論因為細胞在等滲堿液中經過一段時間后也會發生溶血,因而本次的實驗的時間為一小時,所以在1再將紅細胞的沉淀物倒入實驗組的氨水屮時,應當將混勻再開始觀察。60min