【實驗題目】細(xì)胞膜私密性實驗【實驗?zāi)康摹苛私饧?xì)胞膜的滲透性及各種物質(zhì)步入細(xì)胞的速率。【實驗材料與用具】試劑：0.85%NaCI氨水、0.085%NaCI氨水、0.8mol/L乙醇氨水、0.8mol/L液、6%獼猴桃糖氨水、2%-100材料：雞血紅細(xì)胞【實驗原理】細(xì)胞膜是細(xì)胞與環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的選擇性屏障，它是一種半透膜，可選擇性控制物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞。各類物質(zhì)出入細(xì)胞的方法是不同的，水是生物界最普遍的溶劑，私密性高（腎小皮、植物根細(xì)胞更高），水份子可以從滲透抬高的兩側(cè)通過細(xì)胞膜向滲透壓高的右邊擴(kuò)散，這些現(xiàn)象稱為滲透。滲透作用是細(xì)胞膜的主要功能之一。溶血現(xiàn)象將紅細(xì)胞置于低滲鹽氨水中，水份子大量滲到細(xì)胞內(nèi)使細(xì)胞漲破，血紅蛋白釋放到介質(zhì)當(dāng)中，介質(zhì)由不透明的細(xì)胞懸液變?yōu)榘咨该鞯难t蛋白氨水（此時的細(xì)胞膜收縮，會略有不胺類內(nèi)容物），這些現(xiàn)象稱為溶血。紅細(xì)胞在等滲鹽氨水中短時間之內(nèi)不會發(fā)生溶血，然而因為紅細(xì)胞的細(xì)胞膜對不同物質(zhì)透性不同，時間久了，膜外側(cè)的滲透壓平衡會被打破細(xì)胞膜選擇性通透，也會發(fā)生溶血。因為各類溶質(zhì)透過細(xì)胞膜的速率不同，因而發(fā)生溶血的時間也不相同。發(fā)生溶血現(xiàn)象所物質(zhì)穿膜運(yùn)輸?shù)念愋停?）被動運(yùn)輸（不耗能）被動運(yùn)輸分為簡單擴(kuò)散（順含量梯度擴(kuò)散）和協(xié)助擴(kuò)散。
（通道：載體蛋白、通道蛋白）（2）主動運(yùn)輸（耗能）須要跨膜載體蛋白的協(xié)助，這種載體蛋白起到泵的作用，有選擇性地把專情溶質(zhì)逆含量梯度的穿膜運(yùn)輸。親水性分子和離子的穿膜要依賴于專情性的跨膜蛋白【實驗步驟】-、大體流程二、具體操作取雞血6ml,加0.85%NaC堿液4ml,在1000r/min條件下離心5分鐘；（RBC每組取6支試管，分別加入如下堿液各3ml：85%NaCI堿液085%NaCI堿液3mol/L等滲）乙醇堿液堿液(%(5%等滲)獼猴桃糖堿液2%(1.5%等滲)-100向上述6支試管中分別加入50%紅細(xì)胞懸液1滴細(xì)胞膜選擇性通透，輕搖混勻，觀察試管中是否有溶血現(xiàn)象發(fā)生(觀察時間1小時)，記錄溶血時間，并于顯微鏡下觀察各堿液的細(xì)胞。【實驗結(jié)果與剖析】?實驗結(jié)果圖1:0.85%NaCI堿液圖2:0.085%NaCI堿液0.8mol/L乙醇堿液圖7：獼猴桃糖堿液理為word格式II.觀察記錄表編號堿液類型是否溶血溶血時間現(xiàn)象記錄0.85%%NaCI完全溶血6s堿液呈鮮艷的黃色，完全溶完全溶血35s堿液呈鮮艷的黃色；完成溶血的時間很短不完全溶血20m度不高；溶血速率平緩，每隔10min進(jìn)行觀察，發(fā)覺顯微鏡下某些細(xì)胞形態(tài)有所改變6%獼猴桃糖堿液幾乎不溶血1h堿液呈暗灰色乳濁液；溶血速率慢，在1h內(nèi)幾乎沒有溶血現(xiàn)象2%-100完全溶血1mi層有泡沬形成；溶血速率快，且細(xì)胞膜被破壞III.實驗剖析號堿液和雞血是等滲的，在短時間內(nèi)不發(fā)生溶血（時間若過長，膜右側(cè)的滲透壓平衡會被打破，也會發(fā)生溶血）本次實驗中控制溶血觀察時間在內(nèi)；號堿液作為對照和另四種堿液進(jìn)行比號乙醇堿液中的雞血紅細(xì)胞溶血速率很快，在幾十秒內(nèi)就已完全溶血，因乙醇的脂胺類高、分子量小，步入細(xì)胞的速率很快，因而在操作過程中要求速率快，在完全溶血前做好裝片在顯微鏡下觀察;20min左右發(fā)覺有溶血的細(xì)胞（圖4）,在40mi之后發(fā)覺有某些細(xì)胞在顯微鏡下的形態(tài)有變化（圖5、圖6）,因丙三醇步入細(xì)胞，且其對光的折射率很高，使細(xì)胞看起來有缺號獼猴桃糖堿液，因其分子量過大，步入細(xì)胞的速率很慢，在1小時的觀察中，未發(fā)生顯著溶號堿液中添加了表面活性劑，可以將膜蛋白抽提下來，使細(xì)胞膜的私密性減小，快速發(fā)生溶血現(xiàn)象，同時因為有大量膜蛋白被抽提，細(xì)胞結(jié)構(gòu)受到破壞，若操作速渡過慢容易觀察不到細(xì)胞；膜蛋白溶于氨水中促使堿液的透明度沒有2號堿液的高；經(jīng)過本次實驗可以看出，因為溶質(zhì)的脂胺類、分子量等的差別會造成其步入細(xì)胞的速率不同，因而造成溶血時間上的不同，因而可把發(fā)生溶血現(xiàn)象的時間當(dāng)作一種檢測物質(zhì)步入紅細(xì)胞速率的指滴加完50%的血細(xì)胞懸液后，可用食指輕彈試管，使其混和均勻，避免血細(xì)胞墜入頂部，但不要使勁回落，以免細(xì)胞受到人為損毀；注意滴加的次序，因3號堿液再加入血細(xì)胞后溶血時間很短，最好在稍后滴加，并做好提做好小組內(nèi)分工，丙三醇堿液需每隔10min觀察一次，最好安排同一人進(jìn)行計時；在顯微鏡下觀察時，若發(fā)覺細(xì)胞聯(lián)通的較快，可用吸水紙吞掉部份堿液再進(jìn)行觀察；友情提示：本資料代表個人觀點，如有幫助請下載，感謝您的瀏覽!築理為word