細(xì)胞膜流動(dòng)性TMA-DPH螢光偏振光檢查試劑盒試劑盒存儲(chǔ)條件:2-8保存。開蓋后組份按要求條件保存。試劑盒組成:產(chǎn)品組成BB-48118-1BB-48118-2組份編號(hào)尺寸20--500T組份A:TMA-DPH染色液組份B:稀釋液使用說明書各組份存放條件:2-8避光保存;常年不用-20保存。染色液防止反復(fù)凍融,須要常年保存可以分裝后-20保存。有效期:一年。※※※使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說明書※※※使用限制:本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于確診或醫(yī)治。產(chǎn)品更新:貝博TM會(huì)更新或升級(jí)產(chǎn)品,以優(yōu)化和提高其使用性能,產(chǎn)品說明書會(huì)進(jìn)行相應(yīng)的版本更新。使用產(chǎn)品時(shí),請(qǐng)參照試劑盒中隨產(chǎn)品附送的彩印版說明書,不能參照網(wǎng)上下載的說明書,可能是不同的版本。須要最新電子版說明書時(shí)可以在收到產(chǎn)品后發(fā)短信索要。使用安全:使用時(shí)須要合適的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)套,一次性手套。防止皮膚或黏膜與試劑接觸。假如試劑不留神接觸皮膚或雙眼,應(yīng)立刻用水沖洗。質(zhì)量控制:貝博TM對(duì)每批產(chǎn)品進(jìn)行嚴(yán)格測(cè)試以確保產(chǎn)品質(zhì)量一致。知識(shí)產(chǎn)權(quán):貝博系列試劑盒及其使用方式包含專有技術(shù)。
注意事項(xiàng):螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,防止開蓋時(shí)試劑損失。最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底消除殘留清潔劑。實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)依照規(guī)定程序處理。技術(shù)支持:產(chǎn)品技術(shù)問題可發(fā)電郵至咨詢。假若您有任何關(guān)于產(chǎn)品性能或則新應(yīng)用和技術(shù)的建議,歡迎您隨時(shí)聯(lián)系我們。產(chǎn)品簡(jiǎn)介:膜的流動(dòng)性是生物膜結(jié)構(gòu)的基本特點(diǎn)之一,主要指膜脂肪酸鏈部份及膜蛋白的運(yùn)動(dòng)狀態(tài)。膜脂質(zhì)分子在相變氣溫以上條件下主要有側(cè)向擴(kuò)散、旋轉(zhuǎn)、左右搖擺、伸縮振蕩、翻轉(zhuǎn)及異化運(yùn)動(dòng)等形式。膜蛋白的運(yùn)動(dòng)形式大體分為側(cè)向及旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng),主要受脂類雙分子層的影響。脂肪酸不飽和鍵濃度和鏈的寬度顯著影響著膜脂流動(dòng)性,不飽和鍵的存在會(huì)增加膜脂分子間排列的有序性細(xì)胞膜流動(dòng)性,進(jìn)而降低膜的流動(dòng)性,短鏈能減少脂肪酸鏈尾部互相作用,在相變濕度下,不便于凝集,再者,脂肪酸烴鏈圍繞鍵由全反式構(gòu)象到歪扭()的旋轉(zhuǎn)異構(gòu)運(yùn)動(dòng),也可使流動(dòng)性加強(qiáng)。生物膜適合的流動(dòng)性是彰顯生物膜正常功能的必要條件,在一定范圍內(nèi),膜流動(dòng)性降低,有利于膜中酶分子的擴(kuò)散和旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng),使酶活性降低。

一些載體蛋白分子的運(yùn)動(dòng)性也取決于膜中脂質(zhì)分子的流動(dòng)性。研究發(fā)覺病變對(duì)放療抗生素形成的耐藥性主要與細(xì)胞膜糖蛋白過度抒發(fā)蘆丁及其相關(guān)酶系活性改變有關(guān),也有許多研究表明耐藥細(xì)胞膜流動(dòng)性較親代敏感細(xì)胞顯著降低。另有實(shí)驗(yàn)研究發(fā)覺囊腫癌細(xì)胞的惡性程度隨著膜流動(dòng)性的降低而降低,癌癥及轉(zhuǎn)移的病變細(xì)胞的膜流動(dòng)性遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于非轉(zhuǎn)移細(xì)胞。因而,對(duì)敏感及耐藥的病變細(xì)胞膜流動(dòng)性的檢測(cè)有著重要的意義。膜流動(dòng)性的測(cè)定方式主要有螢光探針標(biāo)記,電子載流子共振以及差示掃描量熱法,-DPH試劑盒是借助TMA-DPH測(cè)定膜流動(dòng)性的螢光探針法,它在脂蛋白及其類似系統(tǒng)的單分子層動(dòng)力學(xué)研究中非常有用。TMA-DPH呈圓錐形,會(huì)發(fā)生基于按長(zhǎng)分子軸線平行排列而形成發(fā)射螢光向偶極躍遷,它們對(duì)因?yàn)橹車檀蓟ハ嘧饔枚斐傻脑俣ㄎ皇置舾小K鼈儚V泛地被用于旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)研究中的螢光偏振光剖析。TMA-DPH本身不發(fā)螢光,當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后,螢光大大提高細(xì)胞膜流動(dòng)性,TMA-DPH與可用的細(xì)胞膜表面成比列,其螢光硬度對(duì)由胞吐導(dǎo)致的質(zhì)膜表面積的降低敏感。因而,其螢光硬度對(duì)于造成膜表面積凈變化的生理過程敏感,使其成為用于檢測(cè)例如細(xì)胞容積和胞吐變化的風(fēng)波的優(yōu)異探針。
TMA-DPH螢光偏振光檢測(cè)可與視頻顯微鏡組合,以在大脂類體和單細(xì)胞中提供磷脂次序的空間區(qū)分圖象。傳統(tǒng)的DPH探針可以步入細(xì)胞內(nèi),貝博試劑盒膜示蹤螢光探針TMA-DPH不能步入細(xì)胞內(nèi),因而TMA-DPH探針較DPH探針能更確切的反應(yīng)膜脂流動(dòng)性,本探針的最大迸發(fā)波長(zhǎng)為355nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)為430nm。試劑盒以外自備儀器和試劑耗材:儀器HBSS(Hank'n;With:ose;:。:CaCl2()140mg/L(1.261mM)、MgCl2-/L(0.493mM)、MgSO4-/L(0.407mM)、/L(5.333mM)、/L(0.441mM)、/L(4.167mM)、/L(137.931mM)、()48mg/L(0.338mM)、D-/L(5.556mM))或則PBS(pH7.4,實(shí)驗(yàn)室常用的10mM乙酸緩沖鹽堿液e/’sPBS:約含、、和)或HEPES使用方式:使用注意事項(xiàng):螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體搜集至管底,防止開蓋時(shí)液體散落。
染色液為DMSO堿液,夏季溫度較低時(shí)在溫度時(shí)為融化狀態(tài),極易黏附在管壁、吸頭壁。注意須要加熱溶化,吸頭也須要置于培養(yǎng)箱預(yù)熱,否者容易再度融化在吸頭內(nèi)壁形成耗損。標(biāo)記的條件因細(xì)胞種類而異,按照不同樣本的實(shí)際染色結(jié)果做相應(yīng)調(diào)整,在每次實(shí)驗(yàn)前,請(qǐng)先確定最佳條件。染色工作液的配制:用稀釋液稀釋TMA-DPH探針1000倍-10000倍,配制成TMA-DPH染色工作液。也可以不用試劑盒中的稀釋液,直接用HBSS或無血漿培養(yǎng)基稀釋即可。推薦該探針加載含量在1000-5000倍稀釋,具體的使用含量需依照實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行優(yōu)化。用染色工作液重懸細(xì)胞,在37孵育15-30分鐘。用pH7.4HBSS或或PBS漂洗細(xì)胞1用pH7.4HBSS或或PBS重懸細(xì)胞用該細(xì)胞進(jìn)行檢查。迸發(fā)波長(zhǎng)355nm,發(fā)射波長(zhǎng)430nm。按下述公式估算螢光偏振光度P:P=(IVV-)/(IVV+GIVH)其上校正因子G=IHV/:起偏和檢偏器光軸同為垂直方向時(shí)測(cè)得的螢光硬度;IVH:起偏和檢偏器光軸分別為垂直和水平方向時(shí)測(cè)得的螢光硬度。IHV:起偏和檢偏器光軸分別為水平和垂直方向時(shí)測(cè)得的螢光硬度;IHH:起偏和檢偏器光軸同為水平方向時(shí)測(cè)得的螢光硬度。
值越大,流動(dòng)性越小;P值越小,流動(dòng)性越大。相關(guān)產(chǎn)品:產(chǎn)品產(chǎn)品號(hào)產(chǎn)品產(chǎn)品號(hào)-FITC/PI自噬試劑盒BB-4101細(xì)胞周期檢查試劑盒BB--EGFP/PI自噬試劑盒BB--1線粒體膜電位試劑盒BB-4105MTT細(xì)胞增殖及毒性檢查試劑盒BB-4201活性檢查試劑盒BB-4106CCK-8細(xì)胞增殖毒性檢查試劑盒BB-4202活性檢查試劑盒BB-4107WST-1細(xì)胞增殖毒性檢查試劑盒BB-4203活性檢查試劑盒BB-4108MTS細(xì)胞增殖與毒性檢查試劑盒BB-4204活性檢查試劑盒BB-4112/PI雙染試劑盒BB-4131細(xì)胞自噬形態(tài)學(xué)檢查試劑盒BB-4123DAPI染色試劑盒BB-4133染色試劑盒BB-4137細(xì)胞存活率測(cè)量試劑盒BB-4122AO/EB雙染試劑盒BB-4132
