細胞膜流動性TMA-DPH螢光偏振光檢查試劑盒試劑盒存儲條件:2-8保存。開蓋后組份按要求條件保存。試劑盒組成:產品組成BB-48118-1BB-48118-2組份編號尺寸20--500T組份A:TMA-DPH染色液組份B:稀釋液使用說明書各組份存放條件:2-8避光保存;常年不用-20保存。染色液防止反復凍融,須要常年保存可以分裝后-20保存。有效期:一年。※※※使用前請仔細閱讀產品說明書※※※使用限制:本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于確診或醫治。產品更新:貝博TM會更新或升級產品,以優化和提高其使用性能,產品說明書會進行相應的版本更新。使用產品時,請參照試劑盒中隨產品附送的彩印版說明書,不能參照網上下載的說明書,可能是不同的版本。須要最新電子版說明書時可以在收到產品后發短信索要。使用安全:使用時須要合適的實驗室內套,一次性手套。防止皮膚或黏膜與試劑接觸。假如試劑不留神接觸皮膚或雙眼,應立刻用水沖洗。質量控制:貝博TM對每批產品進行嚴格測試以確保產品質量一致。知識產權:貝博系列試劑盒及其使用方式包含專有技術。
注意事項:螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,防止開蓋時試劑損失。最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底消除殘留清潔劑。實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應依照規定程序處理。技術支持:產品技術問題可發電郵至咨詢。假若您有任何關于產品性能或則新應用和技術的建議,歡迎您隨時聯系我們。產品簡介:膜的流動性是生物膜結構的基本特點之一,主要指膜脂肪酸鏈部份及膜蛋白的運動狀態。膜脂質分子在相變氣溫以上條件下主要有側向擴散、旋轉、左右搖擺、伸縮振蕩、翻轉及異化運動等形式。膜蛋白的運動形式大體分為側向及旋轉運動,主要受脂類雙分子層的影響。脂肪酸不飽和鍵濃度和鏈的寬度顯著影響著膜脂流動性,不飽和鍵的存在會增加膜脂分子間排列的有序性細胞膜流動性,進而降低膜的流動性,短鏈能減少脂肪酸鏈尾部互相作用,在相變濕度下,不便于凝集,再者,脂肪酸烴鏈圍繞鍵由全反式構象到歪扭()的旋轉異構運動,也可使流動性加強。生物膜適合的流動性是彰顯生物膜正常功能的必要條件,在一定范圍內,膜流動性降低,有利于膜中酶分子的擴散和旋轉運動,使酶活性降低。
一些載體蛋白分子的運動性也取決于膜中脂質分子的流動性。研究發覺病變對放療抗生素形成的耐藥性主要與細胞膜糖蛋白過度抒發蘆丁及其相關酶系活性改變有關,也有許多研究表明耐藥細胞膜流動性較親代敏感細胞顯著降低。另有實驗研究發覺囊腫癌細胞的惡性程度隨著膜流動性的降低而降低,癌癥及轉移的病變細胞的膜流動性遠遠低于非轉移細胞。因而,對敏感及耐藥的病變細胞膜流動性的檢測有著重要的意義。膜流動性的測定方式主要有螢光探針標記,電子載流子共振以及差示掃描量熱法,-DPH試劑盒是借助TMA-DPH測定膜流動性的螢光探針法,它在脂蛋白及其類似系統的單分子層動力學研究中非常有用。TMA-DPH呈圓錐形,會發生基于按長分子軸線平行排列而形成發射螢光向偶極躍遷,它們對因為周圍固醇互相作用而造成的再定位十分敏感。它們廣泛地被用于旋轉運動研究中的螢光偏振光剖析。TMA-DPH本身不發螢光,當與細胞膜結合后,螢光大大提高細胞膜流動性,TMA-DPH與可用的細胞膜表面成比列,其螢光硬度對由胞吐導致的質膜表面積的降低敏感。因而,其螢光硬度對于造成膜表面積凈變化的生理過程敏感,使其成為用于檢測例如細胞容積和胞吐變化的風波的優異探針。
TMA-DPH螢光偏振光檢測可與視頻顯微鏡組合,以在大脂類體和單細胞中提供磷脂次序的空間區分圖象。傳統的DPH探針可以步入細胞內,貝博試劑盒膜示蹤螢光探針TMA-DPH不能步入細胞內,因而TMA-DPH探針較DPH探針能更確切的反應膜脂流動性,本探針的最大迸發波長為355nm,最大發射波長為430nm。試劑盒以外自備儀器和試劑耗材:儀器HBSS(Hank'n;With:ose;:。:CaCl2()140mg/L(1.261mM)、MgCl2-/L(0.493mM)、MgSO4-/L(0.407mM)、/L(5.333mM)、/L(0.441mM)、/L(4.167mM)、/L(137.931mM)、()48mg/L(0.338mM)、D-/L(5.556mM))或則PBS(pH7.4,實驗室常用的10mM乙酸緩沖鹽堿液e/’sPBS:約含、、和)或HEPES使用方式:使用注意事項:螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體搜集至管底,防止開蓋時液體散落。
染色液為DMSO堿液,夏季溫度較低時在溫度時為融化狀態,極易黏附在管壁、吸頭壁。注意須要加熱溶化,吸頭也須要置于培養箱預熱,否者容易再度融化在吸頭內壁形成耗損。標記的條件因細胞種類而異,按照不同樣本的實際染色結果做相應調整,在每次實驗前,請先確定最佳條件。染色工作液的配制:用稀釋液稀釋TMA-DPH探針1000倍-10000倍,配制成TMA-DPH染色工作液。也可以不用試劑盒中的稀釋液,直接用HBSS或無血漿培養基稀釋即可。推薦該探針加載含量在1000-5000倍稀釋,具體的使用含量需依照實驗要求進行優化。用染色工作液重懸細胞,在37孵育15-30分鐘。用pH7.4HBSS或或PBS漂洗細胞1用pH7.4HBSS或或PBS重懸細胞用該細胞進行檢查。迸發波長355nm,發射波長430nm。按下述公式估算螢光偏振光度P:P=(IVV-)/(IVV+GIVH)其上校正因子G=IHV/:起偏和檢偏器光軸同為垂直方向時測得的螢光硬度;IVH:起偏和檢偏器光軸分別為垂直和水平方向時測得的螢光硬度。IHV:起偏和檢偏器光軸分別為水平和垂直方向時測得的螢光硬度;IHH:起偏和檢偏器光軸同為水平方向時測得的螢光硬度。
值越大,流動性越小;P值越小,流動性越大。相關產品:產品產品號產品產品號-FITC/PI自噬試劑盒BB-4101細胞周期檢查試劑盒BB--EGFP/PI自噬試劑盒BB--1線粒體膜電位試劑盒BB-4105MTT細胞增殖及毒性檢查試劑盒BB-4201活性檢查試劑盒BB-4106CCK-8細胞增殖毒性檢查試劑盒BB-4202活性檢查試劑盒BB-4107WST-1細胞增殖毒性檢查試劑盒BB-4203活性檢查試劑盒BB-4108MTS細胞增殖與毒性檢查試劑盒BB-4204活性檢查試劑盒BB-4112/PI雙染試劑盒BB-4131細胞自噬形態學檢查試劑盒BB-4123DAPI染色試劑盒BB-4133染色試劑盒BB-4137細胞存活率測量試劑盒BB-4122AO/EB雙染試劑盒BB-4132