借助濁度儀法測定細胞膜透性改變來評估動物組織逆境傷害的程度。實驗原理動物組織遭到逆境傷害時,因為膜的功能損壞或結構破壞,而使其透性減小,細胞內各類水溶性物質包括電解質將有不同程度的外滲,將動物組織溶入無離子水底,水的濁度將因電解質的外滲而加強,傷害愈重,外滲愈多,濁度度的降低也愈大。故可用濁度儀測定外液的濁度度降低值而獲知傷害程度。主要試劑NaCl堿液主要設備濁度儀,天平,溫箱,真空干燥器,抽氣機,恒溫水浴鍋,注射器。實驗材料動物莖稈實驗步驟制做標準曲線如需定量測定透性變化細胞膜透性,可用純NaCl配成100μg/mL的標準液,在2025恒溫下用濁度儀測定,可讀出濁度率。以濁度率為縱座標,NaCl量為橫座標做標準曲線。一份插入小杯中置于40恒溫箱內皺縮0.5,另一份插入杯子中置于溫度下做對照。處理后分別用分餾水沖洗兩次,并用潔凈濾紙榨干。之后剪成長約cm小段倒入小燒瓶中(大小以才能容納電極為度),并用玻棒或干凈錦綸網纏住,在杯中確切加入蒸20mL,浸入莖稈。min以抽出細胞間隙中的空氣。重新緩緩裝入空氣,水即被壓入組織中而使葉下沉。將抽過氣的小燒瓶取出細胞膜透性,置于實驗桌上靜置20min,之后用玻棒輕輕攪亂莖稈,在2025恒溫下,用濁度儀測定堿液濁度率。測過濁度率以后,再倒入100開水浴中15min,以殺害動物組織,取出裝入自來水冷卻恒溫下測其煮熟濁度率。估算結果:按下式估算相對濁度度:相對濁度度(L)=S1/S2相對濁度度的大小表示細胞膜受傷害的程度。因為溫度對照也有少量電解質外滲,故可按下式估算因為高溫或低溫脅迫而形成的外滲,稱為傷害度(或傷害性外滲)。傷害度(%)=((Lt-Lck)/(1-Lck))*100Lt—處理莖稈的相對濁度度;Lck—對照莖稈的相對濁度度。在濁度度測定中通常應用去離子水,若制備困難可用普通分餾水取代,但須要設一空白試管(分餾水作空白),測定樣品時同時測定空白濁度值,按下式估算相對濁度度:相對濁度度(L)=(S1-空白濁度度)/(S2-空白濁度度)注意事項1.CO2在水底的溶化度較高,測定濁度時要避免高CO2氣源和口中呼出的CO2步入試管,以免影響結果的確切性。2.氣溫對氨水的濁度影響很大,故S1和S2必須在相同氣溫下測定。整個過程中,莖稈接觸的器具必須絕對潔凈(全部器皿要瀝干),也不要用手直接接觸莖稈,以免污染。