中國組織工程研究第21卷第12期2017–04–28出版
ofApril28,2017,
·研究原著·
21(12):1843-1848.
DOI:.2095-ORCID:0-3441(吳瑋)
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文題釋義:
細胞膜片:細胞膜片技術是通過數學的方式將擴增融合的細胞從培養皿底壁分離,獲得膜片狀細胞結構的一種技術。與傳統胰酶消化搜集細胞的方式相比,運用該技術搜集到的細胞保留了體外培養過程中分泌的胞外基質、建立的細胞-基質聯接以及細胞間聯接等結構。
組織工程:從機體獲取少量的活體組織細胞,在體外進行培養擴增,之后將擴增的細胞與具有良好生物相容性、可降解性和可吸收的生物材料(支架)按一定的比列混和,使細胞粘附在生物材料(支架)上產生細胞-材料復合物;將該復合物植入機體的組織或臟器病損部位,隨著生物材料在體內逐步被降解和吸收,植入的細胞在體內不斷增殖并分泌細胞外基質,最
終產生相應的組織或臟器,進而達到修補外傷和重建功能的目的。
摘要
背景:基于溫敏培養皿的細胞膜片技術在組織工程研究中遭到越來越多的關注,而且溫敏培養皿價錢昂貴,有必要研究取代方式。
方式:取1例鼻中隔偏曲病人放療摘除的鼻中隔骨膜消化提取原代骨膜細胞,擴增培養。取第3代細胞在體外密集培養,使之分泌細胞外基質,產生雙層細胞膜片;另取第2代骨膜細胞,疊加接種于雙層細胞膜片上,使其貼覆生長,產生單層細胞膜片。應用細胞鏟刀收獲細胞膜片,研究其性狀,進一步在體外培養、植入裸鼠體內建立出人工骨膜塊。
結果與推論:①單層細胞膜片和單層細胞膜片均產生質軟的凝膠樣結構,大體觀察二者無顯著區別;②新刮起的細胞膜片具有良好的可流動性和成膠性;植入裸鼠體內培植8周以后,均產生成熟的骨膜塊;③組織學觀察見細胞膜片是由成層排列的骨膜細胞和細胞外基質組成的薄片,在體外培養過程中即有糖***聚糖和Ⅱ型膠原的初步抒發,植入體內8周過后產生的骨膜呈現為成熟的骨膜組織;④生化定量測量結果表明,DNA濃度低于天然鼻中隔骨膜,而糖***聚糖和甲基脯谷氨酸濃度與天然骨膜差別無明顯性意義;⑤結果提示,應用普通培養皿可成功建立并獲取細胞膜片,細胞膜片呈現良好的成骨膜性能。關鍵詞:
組織建立;骨膜組織工程;細胞膜片;骨膜;培養;普通培養皿;糖***聚糖;Ⅱ型膠原;成骨膜性能;國家自然科學基金
主題詞:
骨膜;培養技術;膠原Ⅱ型;組織工程
基金捐助:
國家自然科學基金青年科學基金項目()
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ZhouLi-bin,WuWei,DingRui-ying,XuBing-xin,HanHao-lun,WangGang,LiBao-wei,WangHong-nan
(ofHeadandNeck,the306thofPLA,,China)
:Thecell-sheet,basedona-,hasbeenmoreandmore;,the-dishisquite.細胞膜片,itistoa.
ISSN2095-21-1581/RCODEN:周麗斌,男,1982年生,廣東省余江縣人,漢族,2011年解放軍第四軍醫學院結業細胞膜片,博士,主治醫師,主要從事骨膜組織工程研究。
通信作者:吳瑋,解放軍第306診所耳鼻喉部脖頸內科,上海市