單位：石家莊市中心診所檢驗科
乳酸酯化酶(,LDH)是一類煙丙酯腺固醇二核苷(NAD)依賴性激酶。LDH的分子量大概為13-140KD，幾乎所有體細胞的細胞質中都富含LDH，其中以骨骼肌、腎和心肌中的濃度最為豐富。
人血漿中的LDH主要是由M、H兩種亞基構成的4聚體，所以它有5種同工酶(LDH1-5)，分別是：主要存在于心肌的LD1(H4)、LD2(H3M1)，主要存在于脾肺中的LD3(H2M2)、LD4(H1M3)，主要存在于肝和橫紋肌中的LD5(M4)。
實際上臨床上常用的α-氨基甲酸酯化酶(α-HBDH)雖然測的是LDH1和LDH2的活性總和。理論上α-HBDH會大于LDH，但實際工作中并非這么。
案例經過
病人男，73歲。納差：間斷上嘔吐4年，加重伴頭暈1月。現病程：間斷上背部痛，腹痛；三年前曾查活檢示萎縮性鼻炎；頭部CT示肝臟囊腫伴闌尾炎；自訴走路不穩，無關節痛；1月前頭暈、食欲不佳，進餐后上手臂搔癢。
查體:T36.4℃、P80次/分、R20次/分、BP120/80mHg，劍突下瘀斑。輔助檢測結果：心電圖-心電圖（十二導）:1.竇性心率；2.II導聯ST-T異常活檢（消化窺鏡室）-胃：萎縮性鼻炎。急診確診：慢性萎縮性鼻炎、營養性腎炎。檢驗科檢測結果如下：
病人驗血結果
病人肝炎三項結果
病人生化結果
綜合病人的檢驗結果可以認定“患者是慢性萎縮性鼻炎引起維生素B12吸收不足造成的巨幼貧”。那何以α-HBDH＞LDH？
案例剖析
要解答以上疑惑，首先我們要弄清實驗室中測量LDH和α-HBDH的原理。本實驗室對LDH的測量原理如圖：
本實驗室LDH的測量原理
由于NADH在340nm處有它奇特的吸收峰細胞膜骨架，所以說LDH的活性與NADH的生成速度成反比。我們把測定NAD+還原率的方式稱之為正反應即L法。我們曉得好多生化反應是單向反應，故也可以測其逆反應即NADH的氧化率，如圖：
實驗室中測定LDH逆反應的測量原理
此時LDH的活性與NADH的消耗速度成反比，此方式稱之為P法。由于生物物理好多反應的正逆反應速度不一樣，例如此方式中P法大概是L法的2.2倍。
目前各大實驗室中都采用IFCC推薦的L法，本實驗室所采用的也是L法。由于L法和P法采用的底物不同（L法以乳酸為底物，P法以乙酸酸為底物），所以測得的LDH也會不同。即采用L法時，LDH的參考范圍為120-250U/L；采用P法時，LDH的參考范圍為200-380U/L。
我們曉得α-HBDH的活性代表乳酸酯化酶中H亞基的活性，因為H亞基主要存在于同工酶LD1和LD2中，為此實驗室中所測得的α-HBDH主要代表LD1和LD2的活性之和。其測量原理如圖：
實驗室中測定ɑ-HBDH測量原理
首先，從圖中我們可以看出α-HBDH的活性和NADH的消耗速度成反比，其本質也是P法。由于P法大概是L法的2.2倍，所以此時出現α-HBDH活性小于LDH活性的情況也就不足為奇了。
其次，值得注意的是：從兩個指標的測量原理我們可以觀察到它們在各自的體系內進行測得，各自的體系環境以及試劑誘因都不一樣，假如α-HBDH反應體系中加入激活劑，也會出現α-HBDH小于LDH的情況。
再度，我們測得的是LDH和α-HBDH的酶活性水平，因為酶的活性受氣溫（LD4和LD5與其它同工酶不同，不是熱變性，而是冷變性）、PH值等誘因的影響，實驗室所測得的酶活性水平是不能與酶含量水平畫等號的。
目前各大診所檢驗科對于LDH和α-HBDH的測量基本上采用的是酶促反應速度法。若果采用免疫學的方式測定其含量，就不太可能出現α-HBDH小于LDH的情況了。另外各大診所檢驗科檢查LDH采用的是L法，假如采用P法，也同樣不太可能出現α-HBDH>LDH的情況。
所以，在臨床檢查過程中，假如出現α-HBDH>LDH的情況也屬于正常現象。其實了，這些情況極少見，雖然出現通常也不會超出多少。
知識拓展
那肝炎為什么會造成LDH下降呢？
由于LDH的主要作用是催化乙醛酸生成乳酸，這是糖無氧代謝的最后一步。糖酵解產出的乙酸酸有兩個去路：一個是生成乳酸；另一個是步入線粒體后進行三乙酸循環完成有氧氧化。由于紅細胞沒有線粒體，不能進行三乙酸循環細胞膜骨架，只能進行無氧酵解，所以LDH主要存在于紅細胞中，其含量是紅細胞外的1000倍。
當病人出現肝炎后，血紅蛋白的濃度降低，紅細胞膜的骨架發生改變，其“縫隙”增大，LDH還會沿著這種減小的“縫隙”漏到紅細胞外。
案例總結
臨床檢驗工作中，對于一些酶類物質的測量大多采用速度法，如肌酸激酶(CK)及其同工酶(CK-MB)、堿性乙酸酶(ALP)、丙氨酸甲基轉移酶(ALT)、天門冬谷氨酸羧基轉移酶(AST)和本案例中涉及到的乳酸酯化酶(LDH)和α-氨基甲酸酯化酶(α-HBDH)等。
速度法測量的不是酶的含量水平而是酶的活性。由于好多誘因都可影響到酶的活性水平，所以生化檢查中所測得的酶的活性水平并不等同于其含量水平。所以當臨床檢查中遇見α-HBDH>LDH這些情況，我們應當從以下三個方面去考慮。：
第一，技巧學。
通常LDH都是用正向反應測定，也就是L法，而α-HBDH測定相當于逆向反應，即P法。由于逆反應大概是正反應的2.2倍，所以測定值2.2倍于正向反應。故雖然出現α-HBDH低于LDH的情況，通常也不會低于2.2倍。
第二，底物不同。
由于α-HBDH主要測定的是H亞基。而H亞基主要存在于LDH1和LDH2之中，故α-HBDH主要測定的是LDH1和LDH2的活性之和。
因其測定采用的底物為ɑ-酮乙酸，而測定LDH時底物采用的是乳酸，二者的底物不同。所以測定α-HBDH時，并不等同于以乳酸為底物時LDH1和LDH2的活性，而是LDH中的H亞基作用于另一種底物ɑ-酮甲酸的反應。
第三，乳酸酯化酶的幾種同工酶的最適pH和最適水溫都不相同，所以測定總的LDH活性時并不等同于這幾種LDH同工酶的最大活性相乘。
專家點評——朱一堂新鄉市中心診所檢驗科組長、主任技師、碩士研究生導師。
在物理領域中，加數+加數=和。并且在臨床檢驗工作中，因為方式學的局限性會出現好多“加數+加數＞和”的情況。例如CK-MB＞CK、直接尿酸小于總尿酸，以及本案例中α-HBDH>LDH。
大多數臨床大夫對于檢驗科的檢驗方式欠缺認識，不能充分理解檢驗報告的內容。作為檢驗人員不但要熟練把握實驗室中各類指標的檢查原理，還要充分把握各類檢查方式的局限性，這樣就能為臨床提供更有價值的檢驗報告，為病人的初期診斷與醫治貢獻屬于檢驗人員的一份力量。
【參考文獻】
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