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相差鏡檢術(shù)在光學(xué)顯微鏡發(fā)展中的重要成就!

更新時間:2024-03-01 文章作者:佚名 信息來源:網(wǎng)絡(luò)整理 閱讀次數(shù):

它是一種通用光學(xué)顯微鏡。 使用光照明,樣本中的每個點根據(jù)其不同的光吸收率在明亮的背景中成像。 它由物鏡、目鏡、聚光鏡、光源、載物臺和支架組成。 聚光鏡用于調(diào)節(jié)顯微鏡的照明,物鏡和目鏡是對微小物體進行放大成像的主要部件。在明場顯微鏡中,具有代表性的是生物顯微鏡。 將生物標(biāo)本用染料染色以增加對比度,成為明視野顯微鏡的主要觀察對象。nAq物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

2. 暗視野觀察nAq物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

暗場實際上是暗場照明。 其特點與明場不同。 它不直接觀察照明光偏光顯微鏡觀察晶體,而是觀察被檢查物體反射或衍射的光。 因此偏光顯微鏡觀察晶體,視野變成黑暗的背景,而被檢查的物體則呈現(xiàn)明亮的圖像。 暗場的原理基于光學(xué)廷代爾現(xiàn)象。 當(dāng)強光直接穿過灰塵時,人眼無法觀察到。 這是由強光的衍射引起的。 如果你用光線傾斜地照射它,由于光的反射,顆粒的尺寸似乎會增加,使得它們對人眼可見。nAq物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

暗場觀察所需的特殊配件是暗場聚光鏡。 其特點是不讓光束從下往上穿過被檢查物體,而是改變光路,使其斜向被檢查物體,使照明光不直接進入被檢查物體。物鏡,利用被檢物體表面的反射或衍射光形成明亮的圖像。 暗場觀察的分辨率遠(yuǎn)高于明場觀察,可達(dá)0.02-0.004nAq物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

3. 相差顯微鏡nAq物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

在光學(xué)顯微鏡的發(fā)展過程中,相差顯微鏡的成功發(fā)明是現(xiàn)代顯微技術(shù)的一項重要成就。 我們知道,人眼只能辨別光波的波長(顏色)和振幅(亮度)。 對于無色透明的生物標(biāo)本,光線通過時,波長和振幅變化不大,在明視場觀察中很難觀察到標(biāo)本。 。nAq物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

相襯顯微鏡是利用被檢物體光路的差異進行顯微檢查,即有效利用光的干涉現(xiàn)象,將人眼無法區(qū)分的相位差轉(zhuǎn)變?yōu)榭蓞^(qū)分的幅度差,即使對于無色透明物質(zhì)。 變得清晰可見。 這極大地方便了活細(xì)胞的觀察,因此相差顯微鏡廣泛應(yīng)用于倒置顯微鏡中。nAq物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

相差顯微鏡的基本原理是將可見光透過標(biāo)本的光程差轉(zhuǎn)化為振幅差,從而提高各種結(jié)構(gòu)之間的對比度,使各種結(jié)構(gòu)清晰可見。 光線穿過標(biāo)本后發(fā)生折射,偏離原來的光路,并被延遲1/4λ(波長)。 如果增加或減少1/4λ,則光程差變?yōu)?/2λ,兩束光束合并后發(fā)生干涉。 加強、增加或減少振幅、增加對比度。nAq物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

4. 微分干涉觀測法nAq物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

微分干涉顯微鏡出??現(xiàn)于 20 世紀(jì) 60 年代。 它不僅可以觀察無色透明的物體,而且圖像呈現(xiàn)出強烈的立體浮雕感。 它還具有相差顯微鏡無法達(dá)到的某些優(yōu)點,觀察效果更好。 逼真。 微分干涉顯微鏡使用特殊的沃拉斯頓棱鏡來分解光束。 分裂梁的振動方向相互垂直且強度相等。 光束在彼此非常接近的兩個點處穿過被檢查的物體,但相位略有不同。 由于兩束光束之間的分光距離極小,因此不會出現(xiàn)重影現(xiàn)象,使圖像呈現(xiàn)三維效果。 差示干式顯微鏡*的物理原理與相差顯微鏡不同,技術(shù)設(shè)計也復(fù)雜得多。 DIC使用偏振光,有四個特殊的光學(xué)元件:起偏器、DIC棱鏡、DIC滑塊和檢偏器。起偏器直接安裝在聚光系統(tǒng)前面,使光發(fā)生線偏振。nAq物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

5、偏光觀察法nAq物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

偏光顯微鏡是用來鑒定物質(zhì)精細(xì)結(jié)構(gòu)光學(xué)性質(zhì)的顯微鏡。 任何具有雙折射的物質(zhì)都可以在偏光顯微鏡下清晰地區(qū)分。 當(dāng)然,這些物質(zhì)也可以用染過的頭發(fā)觀察到,但有些是不可能的,必須使用偏光顯微鏡。 偏光顯微鏡的特點是將普通光轉(zhuǎn)變?yōu)槠窆膺M行顯微鏡檢查,以鑒定某種物質(zhì)是單折射(各向同性)還是雙折射(各向異性)。 雙折射是晶體的基本性質(zhì)。 因此,偏光顯微鏡廣泛應(yīng)用于礦物、化學(xué)等領(lǐng)域。 它在生物學(xué)和植物學(xué)中也有應(yīng)用。nAq物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

6.相差觀察法nAq物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

斜光照射標(biāo)本產(chǎn)生折射和衍射,光線通過物鏡的光密度梯度調(diào)節(jié)器產(chǎn)生不同的陰影,從而在透明標(biāo)本表面產(chǎn)生明暗差異,增加觀察對比度。它不僅可以提高未染色標(biāo)本的可視性和對比度,而且還可以顯示陰影或無光暈的近似三維結(jié)構(gòu),并可以檢測雙折射材料(巖石切片、晶體、骨頭)、玻璃、塑料和其他培養(yǎng)皿。 細(xì)胞、器官和組織nAq物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

7. 熒光觀察方法nAq物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

它以紫外光為光源,照射被檢物體,使其發(fā)出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀和位置。 熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收和運輸,以及化學(xué)物質(zhì)的分布和定位。細(xì)胞內(nèi)的一些物質(zhì),如葉綠素,受到紫外線照射后會發(fā)出熒光; 有些物質(zhì)本身不能發(fā)出熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色,經(jīng)紫外線照射后即可發(fā)出熒光。 熒光顯微鏡是對此類物質(zhì)進行定性和定量研究的工具之一nAq物理好資源網(wǎng)(原物理ok網(wǎng))

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