抗生素與受體互相作用研究在抗生素研制過(guò)程中發(fā)揮著十分重要的作用細(xì)胞膜色譜，其研究方式的方便程度以及確切度直接影響抗生素研制的效率。通常研究抗生素受體的互相作用均采用放射配基結(jié)合剖析法和親和色譜法，但因放射配基結(jié)合剖析法操作復(fù)雜，須要制備特定的放射性配基，使應(yīng)用遭到一定的限制;而一般的親和色譜法須要制備一定數(shù)目及一定含量的受體，難度較大，且可能會(huì)影響受體對(duì)抗生素的選擇性。
1996年，重慶交通學(xué)院賀浪沖院士提出細(xì)胞膜色譜法(cell，CMC)，經(jīng)過(guò)20年的不斷發(fā)展，CMC法已逐漸成為研究抗生素與膜受體親和作用的有力工具之一。CMC系統(tǒng)將完整的細(xì)胞膜包覆于硅膠表面，在仿生理?xiàng)l件下制備成色譜柱進(jìn)行成份受體互相作用研究，可以快速篩選草藥復(fù)雜體系中的活性成份，并確切估算出其與受體間的配位親和常數(shù)。
日前，重慶交通學(xué)院王嗣岑院長(zhǎng)等人在《藥學(xué)進(jìn)展》雜志發(fā)表文章“細(xì)胞膜色譜法用于抗生素與受體互相作用研究進(jìn)展”，詳盡介紹了細(xì)胞膜色譜法的前世此生及相關(guān)應(yīng)用。
傳統(tǒng)的CMC方式經(jīng)歷了2次“更新?lián)Q代”：首先，原CMC模型中分離鑒定采用離線方法完成，即通過(guò)篩選發(fā)覺(jué)在特定細(xì)胞膜固定相上有保留的草藥部位，采用人工方式將保留組分接收并進(jìn)行下一步分離及鑒別。十幾年來(lái)通過(guò)對(duì)CMC模型的改建，現(xiàn)已成功打造集“活性辨識(shí)-色譜分離-剖析鑒別”于一體的CMC/HPLC(GC)/MS在線二維剖析系統(tǒng);借助“雙捕集環(huán)”和“雙富集柱”交替富集-剖析模式，將原有色譜系統(tǒng)成功改建為新的在線二維剖析系統(tǒng);并成功研發(fā)了在線閥控切換裝置，真正實(shí)現(xiàn)了驍龍量篩選。其次，原CMC法中，靶細(xì)胞是通過(guò)生物組織和通常培養(yǎng)方式獲得的，其細(xì)胞膜上的非“目標(biāo)”受體的抒發(fā)數(shù)目好多細(xì)胞膜色譜，而“目標(biāo)”受體抒發(fā)數(shù)目有限且不可控，由此構(gòu)建的CMC法對(duì)官能團(tuán)的特異性、敏感性和選擇性遭到了不同程度的限制。近些年來(lái)，隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展，研究者借助現(xiàn)代分子生物學(xué)手段，借助外源重組引物建立了穩(wěn)定高抒發(fā)野生型表皮生長(zhǎng)因子受體(，EGFR)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(，VEGFR)、成纖維生長(zhǎng)因子受體-1(-1，F(xiàn)GFR-1)等受體的人胚腎細(xì)胞株，并以相應(yīng)受體選擇性拮抗劑為對(duì)照樣品，成功構(gòu)建了受體高抒發(fā)CMC模型，發(fā)覺(jué)了黃芩、獨(dú)活、虎杖、黃芪、川烏和紅毛七中選擇性作用于上述受體的活性組分;分子毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)證明篩選得到的化合物可以抑制相應(yīng)受體蛋白的抒發(fā)，并具有劑量依賴性。
抗生素-受體的親和作用直接影響抗生素的代謝過(guò)程及藥效學(xué)，細(xì)胞膜色譜作為一種全新的生物親和色譜，實(shí)現(xiàn)了高效氣相色譜分離和受體毒理學(xué)的有機(jī)結(jié)合，用于表征抗生素-受體的親和作用并求解抗生素作用的解離常數(shù)。但這個(gè)過(guò)程常常不是幾種簡(jiǎn)單理想的模型就能確切描述，所以怎樣防止測(cè)定中的干擾、增強(qiáng)方式的專屬性是今后研究的重點(diǎn)所在。據(jù)悉，細(xì)胞膜色譜有其特殊性，載體表面的細(xì)胞膜活性隨時(shí)間不斷衰減，因而怎樣將親和色譜理論應(yīng)用到細(xì)胞膜色譜法中，在較短的時(shí)間禪修察官能團(tuán)在細(xì)胞膜固定相上的保留特點(diǎn)，完善快速表征抗生素–受體親和作用的研究方式，也是一個(gè)十分重要的研究課題。
