實(shí)驗(yàn)細(xì)胞保持正常狀態(tài)是實(shí)驗(yàn)成功的基石。您在蛋白抒發(fā)敲低、藥物處理或特殊培養(yǎng)細(xì)胞以后，是否有過第一次實(shí)驗(yàn)結(jié)果令您非常激動、卻在以后的重復(fù)實(shí)驗(yàn)中發(fā)覺了誤差而令您的心情一落千丈的經(jīng)歷？這是這跟您樣本中死亡細(xì)胞的水平有關(guān)。這也是我們明天想要說的一個話題——定期檢測細(xì)胞活性，隨時關(guān)注細(xì)胞狀態(tài)。雖然這組數(shù)據(jù)不是您課題中所必須的，但它卻是您控制實(shí)驗(yàn)的有效手段。
細(xì)胞活性是指樣本群體中健康細(xì)胞所占的比列。細(xì)胞活性的測量對于觀察實(shí)驗(yàn)過程中細(xì)胞的生理狀態(tài)是必須的。細(xì)胞活性會受環(huán)境誘因影響，包括細(xì)胞培養(yǎng)各參數(shù)的改變、藥物和生長因子的剌激以及在各類癌癥下做出的反應(yīng)。諸如，癌細(xì)胞表現(xiàn)出細(xì)胞活性強(qiáng)化，從而導(dǎo)致細(xì)胞異常增殖及逃避細(xì)胞自噬，與之相反的是，神經(jīng)退行性和其他組織退行性疾患則以進(jìn)行性細(xì)胞遺失為特點(diǎn)。損傷和感染也會對細(xì)胞存活形成負(fù)面影響，造成壞死或自噬。以上，細(xì)胞本身的健康與癌癥之間的關(guān)系案例，警示我們在不同實(shí)驗(yàn)背景和模型系統(tǒng)中檢測細(xì)胞活性非常必要。
科學(xué)家們早已開發(fā)了用于不同實(shí)驗(yàn)平臺的多種檢查細(xì)胞活性的技術(shù)。具體來說，細(xì)胞檢查可以依據(jù)測量原理進(jìn)行分組，包括細(xì)胞增殖、質(zhì)膜完整性、代謝活性和線粒體功能。我們不僅通過活性測量快速查看細(xì)胞群體的總體健康狀況，還可以達(dá)到更深層的需求細(xì)胞膜選擇性通透，就是通過它來確定活性損壞時細(xì)胞的死亡形式-細(xì)胞自噬還是壞死。
XTT檢查（XTTCellKit#9095）是一種可用于測量細(xì)胞活性的代謝性檢查方式。在健康細(xì)胞中，XTT通過線粒體酶轉(zhuǎn)換成白色的甲瓚顏料。接著通過測量450nm處的相對吸光度來恐怕活細(xì)胞數(shù)目。這些方式的優(yōu)點(diǎn)之一是操作簡單,不須要細(xì)胞固定、通透或二次檢查方式，而且還能在剖析后能夠繼續(xù)檢測細(xì)胞。
代謝檢查的第二個方法是刃天青檢查（CellKit#11884）。將刃天青試劑添加到細(xì)胞培養(yǎng)物中，在健康細(xì)胞中，刃天青試劑通過酯化酶還原成為螢光試鹵靈，最終試鹵靈的量與樣品中的活細(xì)胞成比列。與XTT檢查類似，刃天青檢查中使用的細(xì)胞也可以繼續(xù)用于下游剖析。
活/死細(xì)胞計數(shù)檢查是評估細(xì)胞活性的另一種常用方式。這一類的測量使用細(xì)胞私密性活體顏料、細(xì)胞不通透顏料或二者的組合，同時標(biāo)記細(xì)胞群體中的活細(xì)胞和死細(xì)胞。諸如，臺盼藍(lán)是一種雜環(huán)顏料，難以穿透細(xì)胞膜，因而不會步入健康細(xì)胞。并且，發(fā)生膜受損的死亡細(xì)胞會吸收臺盼藍(lán)，所以最終能否使用血細(xì)胞計數(shù)器計數(shù)死亡（紅色）和存活（無色）細(xì)胞的數(shù)目。
另外，免疫組織物理法(IHC)也可以測量細(xì)胞活性。這些方式通常用于觀察在健康與腫瘤組織中靶蛋白的分布及抒發(fā)模式，同時在保持組織切塊的完整細(xì)胞構(gòu)架的情況下確定發(fā)生細(xì)胞死亡的區(qū)域。通過使用細(xì)胞增殖（包括Ki67或PCNA）或自噬（包括裂解的-3和PARP）的標(biāo)記物進(jìn)行定量剖析。
評估細(xì)胞活性的方式有好多，您最常做哪一種呢？歡迎留言到評論區(qū)，便于你們交流學(xué)習(xí)。
另外，在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，如上文所提，細(xì)胞的狀態(tài)非常重要，要保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性細(xì)胞膜選擇性通透，可以通過檢測細(xì)胞活性保證細(xì)胞的健康狀態(tài)，趁此機(jī)會。