地址：河北省石家莊市濱江區(qū)濱安路688號天和高科園2實驗?zāi)康牧魇?a href='http://www.njxqhms.com/redianxinxi/33892.html' title='我院中心實驗室的細(xì)胞膜片鉗室研究進(jìn)展順利' target='_blank'>細(xì)胞儀測量各組細(xì)胞線粒體膜電位變化。儀器試劑2.1主要試劑表2.1.1主要試劑儀器廠家胎牛血漿日本,緩沖液英國,培養(yǎng)基日本,培養(yǎng)基日本,Gibco抗生素、鏈霉素雙抗（）0.25%日本,-1線粒體膜電位測量試劑盒上海,碧云天2.2主要儀器表2.2.1主要儀器儀器廠家CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱法國,（SW-CJ-1FD）倒置照相顯微鏡日本,Leica（IX51）無菌操作臺中國,上海凈化（SW-CJ-1FD）低速離心機(jī)中國,北京盧湘儀（5702R）流式細(xì)胞儀日本,BD（）實驗方式3.1細(xì)胞培養(yǎng)H9c2細(xì)胞株為貼壁細(xì)胞，培養(yǎng)于含培養(yǎng)液，待細(xì)胞長至80左右時，用0.25%胰酶消化傳代，放在CO2，37恒溫培養(yǎng)箱中，平均代，取對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行實驗。3.2膜電位測量檢查JC-1染色工作液的配制：取適量容積的JC-1(200)，根據(jù)每50JC-1(200)須要加入mL的超純水比列稀釋JC-1細(xì)胞膜電位，混和后劇烈渦旋混勻，之后加入JC-1色緩沖液（5），混勻后即得JC-1染色工作液。
將對數(shù)期生長的細(xì)胞消化、離心和重懸后，計數(shù)，以每孔3-510中，培養(yǎng)過夜后，每孔加入不同含量的SM-1曝露48小時后，用胰酶消化并搜集細(xì)地址：廣東省廣州市濱江區(qū)濱安路688號天和高科園20.5mL的細(xì)胞培養(yǎng)液中，之后加入0.5mLJC-1染色工作液，顛倒混勻后，放置在細(xì)胞培養(yǎng)箱中37孵育20分鐘。JC-1染色緩沖液（5）需加入mL分餾水的比列，在冰浴條件下配置適量容積的JC-1染色緩沖液（1）。37孵育20分鐘結(jié)束后，以怠速600分鐘，棄去上清細(xì)胞膜電位，盡量不要吸出細(xì)胞。之后用JC-1染色緩沖液（1）清洗次，離心沉淀細(xì)胞，棄去上清。之后加入適量容積的JC-1染色緩沖液（1）重懸后，使用流式細(xì)胞儀測量，迸發(fā)光波長為525nm，發(fā)射光波長為595nm，測定螢光硬度。結(jié)果與討論圖4.1是采用JC-1染色法測量線粒體膜電位結(jié)果。結(jié)果顯示，與對照組相比，DOX1μmolL-1處理細(xì)胞后可以明顯增加線粒體膜電位（p＜0.01），柴胡水提取液12.5，25-1組均就能明顯增加線粒體膜電位（p＜0.05,p＜0.01）。結(jié)果提示，圖4.1各組細(xì)胞線粒體膜電位變化