外泌體是一種由細胞內多泡體與細胞膜融合形成的納米級小囊泡。它們廣泛分布在生物體血液、尿液、胸盆腔腫塊等幾乎所有汗液中。外泌體半徑40~100nm細胞膜受體，密度1.13~1.21g/mL，電鏡下觀察呈杯狀或盤狀。作為細胞間通信和遺傳物質的重要載體，外泌體可以通過各類生物活性分子，如細胞膜受體、蛋白質、信使RNA（RNA，mRNA）和微小RNA（microRNA，miRNA）的轉移直接剌激靶細胞，進而發揮其生物學功能。目前外泌體的發生機制仍不甚明晰，會依照原始細胞不同類型和功能而變。通常覺得外泌體產生和釋放受“內吞體分選轉運復合體”（ESCRT）調節。
外泌體里富含許多對癌癥確診具有重要作用的分子
外泌體的發覺可以溯源到1983年Pan和在研究網織紅細胞成熟到紅細胞的過程的研究里，在她們發表的論文中，未成熟的紅細胞，即網織紅細胞用轉鐵蛋白受體標記并培養以追蹤轉鐵蛋白受體的運動情況。到目前為止，依然沒有一種方式能同時保證外泌體的濃度、純度、生物活性。當前的研究主要集中在外泌體作為醫治靶標、藥物或基因載體以及作為癌癥標志物的應用。
外泌體的結構組份與生物發生
外泌體的鑒別主要依賴于形態學觀察以及對其內含蛋白質、核酸的剖析。常見的外泌體分離提純方式有如下幾種：
離心法：目前最常用提取外泌體的方式，得到的外泌體量多細胞膜受體，但含量不足，電鏡鑒定時會發覺外泌體集聚成塊，不利于后續實驗。密度梯度離心法：常用蔗糖密度梯度離心法，將樣本和2種蔗糖氨水一起超速離心，樣品中的不同組分沉降到各自等密度區。此法得到的外泌體含量高，但前期打算工作繁重，歷時且量少。過濾離心法：外泌體的相對分子質量小于通常蛋白質，選擇不同大小侵吞相對分子質量的超濾膜可使外泌體與其他大分子物質分離。此法操作簡單省時，并且不影響外泌體的生物活性，但缺點在于提取的外泌體含量不足。旋轉超濾法：與過濾離心法原理相像。優點是此法借助甲烷形成的壓力將上清過濾，會降低因為壓力過大導致的外泌體斷裂。同時所需時間短，防止外泌體在開放系統中曝露過久而引起外泌體量降低。連續適應血漿細胞培養結合改良超速離心法：使細胞在血漿梯度遞減的過程中逐步減少對血漿的依賴，最后適應無血漿培養。再將搜集到的上清設置2次離心力，第2次離心力起碼離心3次。免疫磁珠法：借助包被有外泌體相關抗體（如CD9、CD63）抗原的磁珠與外泌體結合進行分離，無需超速離心，但漂洗液會影響外泌體生物活性，得到的外泌體較難進行后續研究。色譜法：借助凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子規格的相對關系對溶質進行分離提取外泌體。改良分子排阻色譜法：可以在白血病患兒小容積（1mL）的血清中可靠且容易地回收形態完整的功能性外泌體。其缺點是搜集的外泌體來自血清，含量不夠高。
參考文獻
YangXX,SunC,WangL,GuoXL.Newinto,andof.J.2019Jul17.doi:10.1016/j..2019.07.021.陳群,吳飏,時國東,etal.病變來源的外泌體在癌癥進展中的作用及其診治意義[J].廣州醫科學院學報:自然科學版,2019,39(02):300-305.
