產(chǎn)品編號：
產(chǎn)品組成：
產(chǎn)品組成
20-200T
50-500T
組份A：TMA-DPH染色液
100μL
250μL
組份B：稀釋液
25mL
100mL
保存條件：
2-8℃避光。常年-20℃避光保存。染色液防止反復(fù)凍融，須要常年保存可以分裝后-20℃保存。有效期1年。
產(chǎn)品簡介：
膜的流動性是生物膜結(jié)構(gòu)的基本特點之一，主要指膜脂肪酸鏈部份及膜蛋白的運動狀態(tài)。膜脂質(zhì)分子在相變氣溫以上條件下主要有側(cè)向擴散、旋轉(zhuǎn)、左右搖擺、伸縮振蕩、翻轉(zhuǎn)及異化運動等形式。膜蛋白的運動形式大體分為側(cè)向及旋轉(zhuǎn)運動，主要受脂類雙分子層的影響。脂肪酸不飽和鍵含量和鏈的寬度顯著影響著膜脂流動性細胞膜流動性，不飽和鍵的存在會增加膜脂分子間排列的有序性，進而降低膜的流動性細胞膜流動性，短鏈能減少脂肪酸鏈尾部互相作用，在相變室溫下，不便于凝集，再者，脂肪酸烴鏈圍繞C-C鍵由全反式構(gòu)象到歪扭()的旋轉(zhuǎn)異構(gòu)運動，也可使流動性加強。
生物膜適合的流動性是彰顯生物膜正常功能的必要條件，在一定范圍內(nèi)，膜流動性降低，有利于膜中酶分子的擴散和旋轉(zhuǎn)運動，使酶活性降低。一些載體蛋白分子的運動性也取決于膜中脂質(zhì)分子的流動性。研究發(fā)覺病變對放療抗生素形成的耐藥性主要與細胞膜P糖蛋白過度抒發(fā)蘆丁及其相關(guān)酶系活性改變有關(guān)，也有許多研究表明耐藥細胞膜流動性較親代敏感細胞顯著降低。另有實驗研究發(fā)覺囊腫癌細胞的惡性程度隨著膜流動性的降低而降低，癌癥及轉(zhuǎn)移的病變細胞的膜流動性遠遠低于非轉(zhuǎn)移細胞。因而，對敏感及耐藥的病變細胞膜流動性的檢測有著重要的意義。
膜流動性的測定方式主要有螢光探針標記，電子載流子共振以及差示掃描量熱法，x線衍射，棱碰共振等。
我司TMA-DPH試劑盒是借助TMA-DPH測定膜流動性的螢光探針法，它在脂蛋白及其類似系統(tǒng)的單分子層動力學(xué)研究中非常有用。DPH及其衍生物（比如TMA-DPH）都呈圓錐形，會發(fā)生基于按長分子軸線平行排列而形成發(fā)射螢光向偶極躍遷。比如，它們對因為周圍固醇互相作用而造成的再定位十分敏感。它們廣泛地被用于旋轉(zhuǎn)運動研究中的螢光偏振光剖析。
傳統(tǒng)的DPH探針可以步入細胞內(nèi)，我司試劑盒膜示蹤螢光探針TMA-DPH不能步入細胞內(nèi)，因而TMA-DPH探針較DPH探針能更確切的反應(yīng)膜脂流動性，本探針的最大迸發(fā)波長為355nm，最大發(fā)射波長為430nm。
細胞膜流動性()TMA-DPH螢光檢查試劑盒試劑盒以外自備試劑耗材和儀器：
●含有偏振光測量裝置的設(shè)備：螢光分光光度計/酶標儀●離心機●HBSS(無酚紅)●PBS
使用注意事項：
●螺旋蓋微量管裝試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體搜集至管底，防止開蓋時液體散落。
●染色液為DMSO堿液，夏季溫度較低時在溫度時為融化狀態(tài)，極易黏附在管壁、吸頭壁。注意須要加熱溶化，吸頭也須要置于培養(yǎng)箱預(yù)熱，否則容易再度融化在吸頭內(nèi)壁形成耗損。
●細胞處理須要當心操作,盡量避開人為的損傷細胞。
●染色后立刻進行剖析。
●標記的條件因細胞種類而異，依據(jù)不同樣本的實際染色結(jié)果做相應(yīng)調(diào)整，在每次實驗前，請先確定最佳條件。
●必須使用細胞螢光檢查專用的白色細胞培養(yǎng)板。
●以下步驟僅供參考。請依照實際實驗方案實際或則參考文獻實驗。
使用方式：
1、染色工作液的配制：
用稀釋液稀釋TMA-DPH探針1000倍-10000倍，配制成TMA-DPH染色工作液。
【注】：
●也可以不用試劑盒中的稀釋液，直接用HBSS或無血漿培養(yǎng)基稀釋即可。
●使用前做預(yù)實驗在推薦含量范圍內(nèi)測試選取最佳含量。
●推薦該探針加載含量在1000-5000倍稀釋，具體的使用含量需按照實驗要求進行優(yōu)化。
2、用染色工作液重懸細胞，在37℃孵育15-30分鐘。
3、用pH7.4HBSS或20mMHEPES或PBS漂洗細胞1次。
4、用pH7.4HBSS或20mMHEPES或PBS重懸細胞。
5、用該細胞進行測量。迸發(fā)波長355nm，發(fā)射波長430nm。
按下述公式估算螢光偏振光度P：
P=（IVV-GIVH）/(IVV+GIVH)
其上校正因子G=IHV/IHH
細胞膜流動性()TMA-DPH螢光檢查試劑盒式中：
IVV:起偏和檢偏器光軸同為垂直方向時測得的螢光硬度;
IVH:起偏和檢偏器光軸分別為垂直和水平方向時測得的螢光硬度。
IHV:起偏和檢偏器光軸分別為水平和垂直方向時測得的螢光硬度;
IHH:起偏和檢偏器光軸同為水平方向時測得的螢光硬度。
P值越大,流動性越小；P值越小，流動性越大。
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